非アルコール性脂肪肝炎への進展に関わる腸管粘膜表層細菌の解析

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K07938
• Research Institution: Kobe University
• Principal Investigator: 酒井 新 神戸大学, 医学部附属病院, 特定助教 (50792636)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 井上 潤 神戸大学, 医学部附属病院, 助教 (50631561) ; 矢野 嘉彦 神戸大学, 医学研究科, 講師 (60419489)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 非アルコール性脂肪肝炎 / 腸内細菌

Outline of Annual Research Achievements

非アルコール性脂肪性肝炎（NASH）は脂肪肝を背景とする肝炎である。さらにBMI正常であるにもかかわらず、膵切除後や消化管術後など腸内細菌変化が起こる患者でNASHを発症する患者が存在する。NASHは、健常人と比べ糞便中の腸内細菌叢構成の違いが指摘されているが、腸管粘膜上皮により近い上皮表面のムチン層内の細菌叢の違いとその病態への影響については不明な点が多い。当研究の目的は患者の腸管粘膜上皮表面の細菌叢に疾患特有性や病勢との関連があるかを明らかにすることである。
これまでの研究で、下部消化管内視鏡による粘膜上皮表面のムチン層に存在する細菌叢の採取方法およびDNA抽出方法、シーケンスライブラリー作成方法などの条件検討を行い、NASH患者15名と非NASH患者10名づつのサンプルの集積が完了した。一部のサンプルを用いて次世代シーケンサーを用いて、粘液表層細菌、唾液、糞便の腸内細菌解析を行い、NASH患者の粘膜表層細菌は健常者のそれとことなっていることを見だした。NASH患者および健常者ともに、同一個人でも粘液中の細菌叢構成は糞便中のものと大きく違う一方で、健常人とNASH患者ともに同一個人内では粘膜表層の細菌は回腸末端や大腸の各場所の部位によらず似通っていることを明らかとした。今後全サンプルでの次世代シーケンサーでの解析を完了し、NASH患者と健常者の腸内細菌の統計的な比較解析、さらにはNASHの病態に関わる腸内細菌の機能変化の解析を進めていく。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

これまでの研究で、下部消化管内視鏡による粘膜上皮表面のムチン層に存在する細菌叢の採取方法の条件検討を行い、粘膜上皮表層のムチン層内の細菌叢構成の次世代シーケンサーによる標準的解析方法を確立した。さらに症例の集積も順調に進み、疾患特異的に粘膜表層の細菌叢構成の異常を見出した。
そのため、本研究が順調に進展していると考える。

Strategy for Future Research Activity

今後全サンプルでの次世代シーケンサーでの解析を完了し、NASH患者と健常者の腸内細菌の統計的な比較解析、さらにはNASHの病態に関わる腸内細菌の機能変化の解析を進めていく。

Causes of Carryover

コロナウイルス蔓延のため学会発表を見合わせ次年度以降に延期したことや、解析によっては、今年度と次年度で施行する順序が変更になり、それに伴い物品費やその他検査費用などが変化し次年度使用額として生じた。次年度使用額として持ち越された研究費を予定通りの解析や発表に使用する。