2019 Fiscal Year Research-status Report
質量分析計によるレジオネラ属菌の同定及び血清型別法の構築・臨床応用
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19K07947
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| Research Institution | Azabu University |
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Principal Investigator |
曽川 一幸 麻布大学, 生命・環境科学部, 准教授 (50436440)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
古畑 勝則 麻布大学, 生命・環境科学部, 教授 (00308305)
谷口 俊文 千葉大学, 医学部附属病院, 講師 (20724826)
石毛 崇之 千葉大学, 医学部附属病院, 臨床検査技師 (30757315)
小寺 義男 北里大学, 理学部, 教授 (60265733)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | レジオネラ属菌 / MALDI-TOF MS / 細菌同定 / 血清型別 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
高い迅速性と正確性を有し、しかも低コストの細菌同定手法として、Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry（MALDI-TOF MS）質量分析装置が、2011年に医療機器として認定され、細菌同定のツールとして運用されている。国内における微生物検査ならびにその内部精度管理は主に米国の臨床検査標準協会の基準の基で実施されている。しかしながら、MALDI-TOF MSによる細菌同定の内部精度管理を実施している施設はわずかである。令和元年度前半に日常業務に適したMALDI-TOF MSによる細菌同定における内部精度管理の実施要領の作成を行った。
令和元年度後半にレジオネラ属菌の同定率の向上に向けたデータベース構築を行った。
MALDI Biotyper database に登録されているレジオネラ属菌の菌株数が31菌種89株と非常に少ないため、独自のデータベースを構築する必要がある。レジオネラ属菌同定の従来法は、細菌自動分析装置である BD Phoenix system (BD Diagnostics Systems)、API system (Sysmex Biomerieux)と生化学的性状で判定する。 従来法と質量分析法の同定結果が異なった場合は 16S rRNA 遺伝子のシークエンス解析を行う。 まず麻布大学生命・環境科学部微生物学研究室に保存してある保存菌株50株を使用してデータベースを構築を進めている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
2017年6月に検体検査の品質・精度確保に関する医療法等改正法案が可決・公布され、それに伴い改正された厚生労働省令（医療法施行規則、臨検法施行規則）が2018年7に公布、同年12月1日に施行された。この改正により、臨床検査を実施している施設には精度管理の法的基準が導入されることとなった。当初の予定では、内部精度管理の実施要領の作成は計画していなかったが、日常業務に適したMALDI-TOF MSの実施要領の作成した。
レジオネラ属菌の同定率の向上に向けたデータベース構築を行った。麻布大学生命・環境科学部微生物学研究室に保存してある保存菌株50株を使用してデータベースを構築を進めている。現在、20株程度の測定が終了している。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和2年度前半に麻布大学生命・環境科学部微生物学研究室に保存してある保存菌株50株を使用してレジオネラ属菌データベースを構築し、千葉大学医学部付属病院に保管してある臨床分離株で検証を行う。
令和2年度後半にL. pneumophiliaの血清型別解析を行う。L. pneumophiliaの血清型別を解析するデータベースはMALDI Biotyper databaseに登録されていないため、独自のデータベースを構築する必要がある。L. pneumophiliaの血清型別の従来法は、レジオネララテックスキット（関東化学）で判定する。 まず麻布大学生命・環境科学部微生物学研究室に保存してあるL. pneumophilia保存菌株40株（1型、2型、3型、6型各10株）を使用してデータベースを構築する。
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| Causes of Carryover |
MALDI-TOF MSに使用するマトリックス試薬が年度内に届かなかったため
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