2021 Fiscal Year Research-status Report
In vitro evaluation of fatty acid oxidation capacity for accurate prognosis of fatty acid oxidation disorders
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19K08300
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| Research Institution | Shimane University |
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Principal Investigator |
山田 健治 島根大学, 医学部, 特別協力研究員 (70624930)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | in vitro probe assay / FAO flux / 脂肪酸代謝能 / VLCAD欠損症 / 脂肪酸代謝異常症 / CPT2欠損症 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
脂肪酸代謝異常症はグルコース欠乏時の代替エネルギーとして働く脂肪酸がうまく分解できず、重篤なエネルギー代謝不全を呈する疾患群である。中間型といわれる重症度であっても時に重篤な低血糖や致死的な不整脈、心筋症などで亡くなることもある一方で、生涯発症しない、あるいは成人期以降に軽微な筋症状が出る程度の最軽症/無症候例も多数いることが分かっている。本研究では、インビトロの実験系を用いて包括的に脂肪酸代謝能を測定し、正確に最軽症/無症候例を鑑別することが目的である。
2020年度からの継続的な実験において、VLCAD欠損症とCPT2欠損症の患者由来細胞を用いたインビトロでの脂肪酸代謝能の測定において、熱ストレスが脂肪酸代謝異常症を低下させることを突き止めたが、疾患の重症度などによるバラつきや違いはなく、熱ストレスを応用した重症度の判定は難しいことが分かった。
また、培養液にフィブラート系製剤などの脂肪酸代謝能を修飾する薬剤を添加して培養し、重症度で薬剤反応性が異なるかどうか調査した。元々、我々はこれまでにベザフィブラートで重症型と中間型の反応性が違うことを報告しているが、2021年度の実験において薬剤反応性の違いで中間型と最軽症型を分類することは難しいことが分かった。また、別のフィブラート系製剤であるペマフィブラートを加えた場合、疾患の種類や重症度に依らず薬剤反応性がなく、これは治療薬として応用できないことが新たに分かった。現状では薬剤や培養温度など、様々な要因で脂肪酸代謝能が変化することを突き止めたが、中間型と最軽症型を正確に分類することは非常に難しいと推察される。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
最も大きな理由は、主任研究者である山田が、大学病院から市中病院へと異動となり、当初予定していたエフォートを割けなくなったことである。
また、2020年度途中から、当初使っていたFAO fluxを測定するための消耗品が販売中止となり、それの代替品を選定する上で、複数回の予備実験を行うこととなった上に、これまでの研究結果との比較が出来ず、過去に行った実験を新しい消耗品でやり直す手間が増えた。
さらに、当初の予想と異なり、熱ストレスや薬剤負荷による脂肪酸代謝の修飾では、再軽症型を同定するような結果が得られていないため、更に別の培養条件を検討する必要がある。
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| Strategy for Future Research Activity |
現状の測定法では最軽症/無症候型と、健常コントール、中間型はオーバーラップするために完全に分類することは出来ていない。培養条件を変更することで検査の精度向上を図りたい。
また、熱ストレスによって脂肪酸代謝能を抑えたことが軽症例の分離に繋がる、という既報があり、これを追認しようと考えたが、我々が用いているIVPアッセイやFAOフラックスという脂肪酸代謝能測定法では、軽症例を同定するような結果が得られなかった。恐らく既報のものとインビトロでの脂肪酸代謝能測定法が異なることが大きな原因と思われるが、対象として用いている細胞の遺伝子型なども違うことが影響していると思われる。対象となる疾患や重症度、遺伝子型などを纏めて、我々の方法でどこまでの重症度であれば正確に病型分類できるのか突き止めたい。
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| Causes of Carryover |
当初，業績発表を予定していた学会や研究会がCOVID-19の影響で中止、延期、あるいはweb開催となり、出張費用を使う機会がなかった。また、主任研究者が異動となり実験そのもののがスケジュール通り進行しなかったため、全体的に当初の予算より実支出額が少なくなってしまった。
2022年度は、脂肪酸代謝能の測定精度を高めるために、種々の培養条件を検討するため、培養細胞を扱う実験で用いる消耗品を購入したり、研究成果の発表のための学会出張費や英語論文の校正費用などに充てたい。
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Research Products
(5 results)
