2021 Fiscal Year Research-status Report
ヒト化マウスによる胎生期HTLV-1感染モデルの構築と胎盤を介した感染機構の解明
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19K08357
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| Research Institution | National Institute of Infectious Diseases |
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Principal Investigator |
野島 清子 国立感染症研究所, 次世代生物学的製剤研究センター, 主任研究官 (60370970)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | HTLV-1 / 母子感染 / 経胎盤感染 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ヒト化マウスを用いたHTLV-1母子感染・胎盤感染モデルの構築は、免疫不全胎仔マウスのヒト化が難しく困難と考えられていたが、本研究では、妊娠初期のNOG マウスにヒト末梢血を移植して妊娠ヒト化マウスとした後，HTLV-1感染細胞を移植して仔マウスを産ませることで、HTLV-1母子感染モデルの構築し、このモデル を用い、HTLV-1感染細胞が胎盤へ移行するのか、感染細胞が胎盤バリアを突破して胎仔側へ移動するのか、それともフリーのウイルス粒子が移行するのか、また どこで感染が起こり，感染細胞が潜伏するのか等を長期モニタを行い、母子→胎児間での血液細胞の移行、免疫細胞の移行を明らかにして母子感染のメカニズム を明らかにする。 当年は、母子感染モデルを至適化し、造血系ヒト化胎仔マウスの構築とHTLV-1感染モデルの構築を目指した。超免疫不全マウスであるNOGマウスを交配し，胎仔 の器官原器形成が安定化する妊娠初期(10 -14日) にヒトPBMCsを妊娠NOGマウスヘ腹腔移植後、2日後にマイトマイシンC処理したMT-2細胞を腹腔移植し，新生児 の感染の有無をPCR及び組織学レベルで検証し、2匹の妊娠マウスから産まれた15匹の新生児マウスのうち6匹において感染が認められ効率の良い母子感染モデル が構築出来た。今後、母子胎児間での血液細胞の移行、免疫細胞の移行を明らかにして母子感染のメカニズムを明らかにする。 また、この母子感染モデルを用いてHTLV－１に感染させた妊娠ヒト化マウスにおいて、出産前の妊娠17-18日目に胎仔マウスを取り出し，母体血の混入を抑え， 実体顕微鏡下で羊水，胎盤，胎仔に分け，胎盤中のHTLV-1プロウイルスをPCRで検出する系を構築した。次年度は、新生児期のマウスと母乳育児後のマウスにお ける感染動態を比較し，経胎盤感染の重要性について検証する。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
当初の通り、超免疫不全マウスであるNOGマウスを用いて、妊娠初期(10 -14日) にヒトPBMCsを妊娠NOGマウスヘ腹腔移植後し、移植2日後にマイトマイシンC処理 したMT-2細胞を腹腔移植して感染仔マウスを出産させる，母子感染モデルの構築、および妊娠17-18日目に胎仔マウスを取り出し，母体血の混入を抑え，実体顕 微鏡下で羊水，胎盤，胎仔に分けて解析することにより、胎盤中のHTLV-1プロウイルスをPCRで検出する系を予定通り構築できた。またキャリア母マウスの末梢血、肝臓、感染仔マウスのクローン解析を実施した。今年度は新型コロナウイルス感染症による業務集中により研究に遅れが出ている。
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| Strategy for Future Research Activity |
超免疫不全マウスであるNOGマウスを用いて、妊娠初期(10 -14日) にヒトPBMCsを妊娠NOGマウスヘ腹腔移植後し、移植2日後にマイトマイシンC処理 したMT-2細胞を腹腔移植して感染仔マウスを出産させる系で、構築した母子感染モデルを用いて、妊娠17-18日目に胎仔マウスを取り出し，母体血の混入を抑え，実体顕 微鏡下で羊水，胎盤，胎仔に分けて解析することにより、胎盤中のHTLV-1プロウイルスをPCRで検出するし、これまで得られた知見の再現性を確認する。また、感染動物実験で得られるキャリア母マウスの末梢血、肝臓等の臓器、感染仔マウス肝臓等の組織を用いたクローン解析の再現性を得るための実験を行う。
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| Causes of Carryover |
新型コロナウイルス感染症の影響で令和3年度内に実施予定であった実験が実行できなかったため次年度に実施を計画している。
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