2020 Fiscal Year Research-status Report
STEAP1を介した酸化ストレス制御による新規肝細胞癌治療法の開発
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19K08397
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| Research Institution | Sapporo Medical University |
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Principal Investigator |
高田 弘一 札幌医科大学, 医学部, 講師 (90398321)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中村 元 札幌医科大学, 医学部, 研究員 (10792666) [Withdrawn]
加藤 淳二 札幌医科大学, 医学部, 教授 (20244345)
宮西 浩嗣 札幌医科大学, 医学部, 准教授 (60372819)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | STEAP1 / 肝細胞癌 / c-Myc |
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| Outline of Annual Research Achievements |
これまで報告されていないSTEAP1がHCCの病態生理に及ぼす影響を解析し、新規HCC治療法開発を目指している。以下に当該年度の具体的な研究実績を示す。
①STEAP1シグナル伝達経路の解析；GSE14520(GPL3921）のpublic dataをGEO2Rを用いて，STEAP1の高発現群10%と低発現群10%において，differentially expressed genes (DEG)を検討した。Cut-off値をadj.P value < 0.05 かつ |logFC|>2とし，Volcano plotを作成した．これらのDEGに関して，GEPIAを用いてTCGAのデータセットにアクセスし，STEAP1発現と有意な正の相関が認められる遺伝子の抽出を行った．その結果，C9,GPX2,c-Myc,ROBO1であった．これらの遺伝子のうち、STEAP1 K/Dによりc-MycのmRNAおよびタンパク発現量が有意に低下することをqPCRおよびWestern blotで明らかにしている。②STEAP1 K/Dによるc-Myc target genesの発現が低下していることをPCR arrayで確認した。③STEAP1 K/Dにより細胞内ROSが上昇することをCellROX DeepRedを用いたフローサイトメーターで証明した。④前年度でSTEAP1 K/DによりG1 arrestが惹起されることを見出している。当該年度ではWestern blotでG1 arrestを惹起するcyclin D1の低下ならびにp27の発現増加を明らかにしている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
新規知見としてSTEAP1のシグナル伝達経路にc-Mycが関わっていることを見出している。また、STEAP1 K/Dにより細胞内ROSが上昇することも確認できているため。
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| Strategy for Future Research Activity |
STEAP1 K/DによるROS上昇の機序を解析するため、NRF2およびKEAP1の発現解析を行う。また、STEAP1 K/Dによるlenvatinib感受性変化も検討する予定である。
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| Causes of Carryover |
当該年度の研究内容は，in silico解析が多かったため次年度使用額が生じた．今年度は，in silico解析結果から得られた知見をin vitroで確証研究を行う予定である．
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Research Products
(3 results)
