2019 Fiscal Year Research-status Report
Identification of sentization markers and elucidation of drug resistance mechanism for a CK2 inhibitor on cholangiocarcinoma
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19K08449
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| Research Institution | Nagoya City University |
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Principal Investigator |
宮部 勝之 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 研究員 (00543985)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
吉田 道弘 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 助教 (20636328)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | CK2阻害薬 / Silmitasertib / 胆道癌 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
セリン・スレオニンキナーゼの一種であるCK2の阻害薬Silmitasertibは、腫瘍増殖と共にDNA修復酵素を抑えることでGEMやCDDPの抵抗性をも抑えると言われており、胆管がん細胞株を用いて申請者らが行った前臨床試験にて、本薬剤とGemcitabine(GEM)+Cisplatin(CDDP)との併用による上乗せ効果を確認した。本薬剤を使用した第2相臨床試験も行われているものの、臨床上の効果を予測するバイオマーカーはまだ見出されておらず、また他の薬と同様に治療抵抗性を示す病態の存在も予想される。我々はSilmitasertib抵抗性に寄与する機序を追求することで腫瘍発生・進展メカニズムへの影響を検討すると共に、効果予測判定につながるバイオマーカーを同定しするため、本年度は薬剤抵抗性を示す胆管癌細胞株の作成およびRNA sequencingを用いた薬剤抵抗性遺伝子異常の候補検出を行うこととなっていた。
研究代表者らは、胆管癌細胞株HuCCT1を用い、Silmitasertib抵抗株作成を開始している。Silmitasertib濃度を1μMから徐々に上げて薬剤耐性株を作成しているが、一定濃度以上にSilmitasertibを上げると細胞株が死滅してしまう状態であり、現在継代を続けている状態である。
また、研究代表者が米国Mayo Clinicに赴き、HuCCT1にSilmitasertibを投与したxenograftなどからすでにDNAを抽出した。実験ではRNA sequenceを行う予定であったが、今回はDNAを抽出したことから、Exome sequenceを行うべく準備を進めている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
研究代表者らは、胆管癌細胞株HuCCT1を用い、Silmitasertib抵抗株作成を開始している。Silmitasertib濃度を1μMから徐々に上げ、25.6μMまで上げることができたが、それ以上に濃度を上げると細胞株が死滅してしまう状態であり、何度も最初からやり直したが、現在25.6μMにて継代を続けている状態である。
研究代表者が米国Mayo Clinicに赴き、HuCCT1にSilmitasertibを投与したxenograft、GEM+CDDPを投与したxenograft、Silmitasertib＋GEM+CDDPを投与したxenograft、およびこれらの抗がん剤が投与されていないコントロールのxenograftのxenograftからすでにDNAを抽出した。実験ではRNA sequenceを行う予定であったが、今回はDNAを抽出したことから、Exome sequenceを行うべく準備を進めている。
2020年4月22日に先方の研究室スタッフとteleconferenceを行った。コロナウイルスの流行に伴い、米国のゲノム解析委託研究室も一時閉鎖させれていたため、本年3月に行われる予定であったExome sequenceはまだ施行されていないが、最近研究室が閉鎖解除になったため、解析を数か月以内に行う予定である。
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| Strategy for Future Research Activity |
引き続き、HuCCT1を用いて、Silmitasertibの薬剤耐性株を作成していくとともに、Exome sequenceを行い、Silmitasertibを投与したxenograftのデータと同薬剤を投与されていない薬剤のデータを比較することで、薬剤抵抗性遺伝子異常の候補を検出する。データをもとに、実際に薬剤抵抗性細胞株から候補遺伝子異常除去後に薬剤感受性が回復するかを検証することで、薬剤抵抗性に関与する遺伝子異常を同定し、関連する薬剤抵抗性因子の存在確認を検体上で行う。まずはここまでを行うこととする。
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| Causes of Carryover |
Exome sequenceを行っておらず、その金額は次年度に持ち越されます。
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[Presentation] The role of the biliary and gut microbiome in the progression of cholangiocarcinoma and primary sclerosing cholangitis2019
Author(s)
Katsuyuki Miyabe, Vinay Chandrasekhara, Nicha Wongjarupong, Jun Chen, Stephen Johnson, Nicholas Chia, Marina Walther-Antonio, Gregory J. Gores, Mark D. Topazian, Purma C. Kashyap, Lewis R. Roberts, et al.
Organizer
American College of Gastoenterology Annual Meeting 2019
Int'l Joint Research
