In vivo imaging study of JCAD in the pathogenesis of DVT

2021 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 19K08517
• Research Institution: Kobe University
• Principal Investigator: 川合 宏哉 神戸大学, 医学研究科, 客員教授 (20346266)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 原 哲也 神戸薬科大学, 薬学部, 准教授 (70547504)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 深部静脈血栓

Outline of Annual Research Achievements

１．JCADの血栓症発生への影響の解明　まず、JCADが血栓形成を制御しているか否かを直接的に確認するために、JCAD-/-マウスと野生型マウスにおけるDVTサイズを比較する。具体的には下大静脈を結紮後、day 4, 7, 14に血栓サイズをJCAD-/-マウスと野生型マウスの間で比較する。JCAD-/-マウスでは、DVTサイズが野生型と比べて、大型になるという結果を得た。
２．生体イメージングによるJCADの血栓形成制御機構の解明　研究分担者の原哲也が独自に開発した（特許申請済み）血栓モデルにより、血栓が形成される瞬間をリアルタイムに観察可能となった。血栓形成には白血球の血管内皮への接着が重要であることから、白血球をローダミン６Gで蛍光標識し、血栓形成の瞬間における白血球の動態を生体下に可視化、定量する。その他、蛍光標識抗体を用いて接着因子やフィブリン、MMPsenseによる炎症活性などを、生体下の血栓で可視化する。すなわち、血栓形成におけるこれら白血球浸潤や接着因子、凝固カスケードから炎症活性をJCAD-/-マウスにおいて解析し、JCADが血栓形成のどの過程に影響しているかを明らかにする。我々は、JCAD-/-マウスにおいて、実際に二光子顕微鏡などを用いた生体イメージング技術を応用することに成功した。