心筋虚血再灌流障害の克服を目指したSirt7の新たな機能解析

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K08561
• Research Institution: Kumamoto University
• Principal Investigator: 荒木 智 熊本大学, 大学院生命科学研究部(医), 助教 (20706717)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: Sirt7 / 虚血再灌流障害 / 酸化ストレス

Outline of Annual Research Achievements

本研究の目的は虚血再灌流障害におけるSirt7の役割を検討し、新たな治療ターゲットを見出すことである。これまでの検討により、Sirt7ノックアウトマウスおよび心筋特異的Sirt7ノックアウトマウスとを用いたin vivoの検討によりSirt7の欠如が心筋虚血再灌流後の再灌流障害を抑制することを見出した。また培養心筋細胞においても低酸素/再酸素化刺激による細胞障害もSirt7ノックダウンにより抑制されていた。さらにqRT-PCRによる評価では低酸素/再酸素化後のHO-1やNQO-1といった抗酸化物質の発現がSirt7ノックダウンにより増加しており、これらはウエスタンブロット法による蛋白定量でも同様の結果であるも見出していた。
そのため本年度はSirt7がどのような経路を介して、酸化ストレス応答に関与しているかの検討を行った。HO-1およびNQO-1は転写因子であるNRF2により制御を受けるため、Sirt7がNRF2の発現に影響するかを培養心筋細胞を用いて検討を行った。ルシフェラーゼ活性測定によるNQO-1promoter活性はSirt7ノックアウトにより上昇することを見出したが、Sirt7はNRF2の発現にはｑRT-PCRおよびウエスタンブロット法の蛋白定量法ともに影響を与えておらず、また共免疫沈降法による評価でもSirt7とNRF2との結合は見られず、Sirt7がNRF2以外の因子に影響を与えている可能性が考えられた。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

Sirt7の欠如が心筋虚血再灌流障害に対して保護的に働くことを、Sirt7ノックアウトマウスを用いたin vivoの検討および心筋培養細胞を用いたin vitroの検討ともに確認できている。

Strategy for Future Research Activity

Sirt7がどのような経路で酸化ストレス応答を制御するかを検討するため、本年度はNRF2以外の転写因子にも注目し、Sirt7のターゲットの検出を行っていく。

Causes of Carryover

Covid19感染拡大もあり海外学会への参加等ができず旅費が0円となっていることが影響していると考えられた。