肺癌オルガノイドライブラリーを用いた新規治療標的の同定

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K08610
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 浜本 純子 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 特任助教 (40570239)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 安田 浩之 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 講師 (70365261)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 肺癌 / オルガノイド

Outline of Annual Research Achievements

本研究では根治性の高い肺癌の新規治療法の開発を行い、肺癌患者の予後を改善することを目的とし、肺癌患者検体からのオルガノイドライブラリー作成とライブラリーに対して全遺伝子を個別にノックアウトできるシステムであるCRISPR/Cas9スクリーニング施行することにしている。
ライブラリー作成に関しては申請前までに樹立していた細胞株に加え、新たに様々な検体からの樹立を継続して行い、ライブラリーの拡張を行っている。並行して肺癌手術検体の隣接する正常部位から正常肺オルガノイドのライブラリー作成にも成功し、肺癌の新規治療標的となり得る遺伝子変異及びシグナル経路発見を目的として、これら正常と癌のwhole exome sequence, RNA-seqの比較を行った。見つかったシグナル・遺伝子の阻害を行うことにより肺癌の治療法になる可能性があるので、この可能性をマウスxenograftで検討している。
CRISPR/Cas9スクリーニングに関しては、研究分担者及び協力者が既に行っていた方法で肺癌オルガノイドで目的の遺伝子がノックアウトできること、また、sgRNAライブラリーを用いた網羅的なノックアウトスクリーニングもできることを確認できた。正常オルガノイドでは見られず、肺癌オルガノイドに特異的な遺伝子異常のうち、治療候補になりそうなものを検討している。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

予定通り進んでいる

Strategy for Future Research Activity

引き続き肺癌ライブラリーの拡張を行う。
CRISPR/Cas9スクリーニングに関しては、樹立したライブラリーのうち、発癌機序が不明の検体に関してスクリーニングを施行し、肺癌の新しい治療標的探索を目指す。