悪性胸膜中皮腫におけるMET遺伝子異常の解明と新薬の個別化治療への臨床応用

2022 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 19K08664
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 川田 一郎 慶應義塾大学, 保健管理センター(日吉), 准教授 (00327503)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: 悪性胸膜中皮腫 / オルガノイド / 薬剤感受性 / Precision medicine

Outline of Annual Research Achievements

本研究は、予後の厳しい悪性胸膜中皮腫（malignant pleural mesothelioma; MPM）患者への新たな治療薬と個別化治療への臨床応用を目的としている。有効な臨床応用モデルの確立が必要であり、三次元的にin vitroでつくられた臓器であるオルガノイドを用いたMPMモデルの樹立に成功した。現在までに合計51ラインのMPMオルガノイド樹立を試みた。樹立は一時成功するも、多くの検体で継代が困難となることが判明した。現時点で９症例が安定して継代され更なる研究に利用可能である。
樹立効率の改善のために、樹立に際して適するmediumの検討をおこなっている。他の中胚葉由来の生殖器系悪性腫瘍などのオルガノイド培養時のmediumでの培養も検討している。症例集積を継続しながら、同時に同一患者においての、治療前後の臨床検体でのオルガノイド樹立を継続する。これにより、治療に伴うMPMの分子進化を把握し、化学療法や免疫治療に対する耐性化機序などを同定できる可能性がある。
分子シグナル伝達経路を標的とした新たな治療探索のため、樹立したMPMオルガノイドでRNA-seqを用いてその分子異常の把握に努める。そして、MPMにおけるMETシグナル経路異常の生物学的意義を検証していく。現在樹立したオルガノイドを用いてゲノムシークエンスを進めており、それぞれのラインでMPMに特異的な遺伝子変異を認めることが判明した。RNA-seqのデータから主成分解析PCAを行い、MPMは、腺癌, 扁平上皮癌, 小細胞肺癌, 正常肺胞, 気道上皮とは異なる分布を示した。Nicheの検討でYAP経路やFGF経路が増殖に関与することが予測されたため、現在RTKアレイなどでの解析を検討している。更に、もとの患者組織との相同性を確認するため、オルガノイドの免疫染色やXenograftモデルでの検証を行っている。