2019 Fiscal Year Research-status Report
CALR変異幹細胞の増幅機構及び変異体の機能モチーフを標的とした骨髄線維症の制御
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19K08819
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| Research Institution | University of Miyazaki |
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Principal Investigator |
幣 光太郎 宮崎大学, 医学部, 助教 (20468028)
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2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | 骨髄増殖性腫瘍 / 原発性骨髄線維症 / 造血幹細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、原発性骨髄線維症のドライバー変異であるcalreticulin(CALR)の変異を研究対象として、「CALR変異造血幹細胞(hematopietic stem cells:HSCs)のクローン拡大機序」、「CALR変異蛋白による増殖シグナル活性化機序」を解明する。
2019年度は、世界初の血球細胞特異的Calrノックアウトを作出し、造血におけるCalrの役割について明らかにした。更に、CALR変異HSCsのクローン拡大機序に関して、同ノックアウトマウスの解析結果から、Calr遺伝子のヘテロ欠損がHSCsの競合再構築能を亢進させること、そしてCalrヘテロ欠損がCALR変異を有するHSCsのクローン拡大能を強化することを示し論文を発表した(Blood in press)。
CALR変異蛋白による増殖シグナル活性化機序に関しては、CALR変異体タンパクについて様々なdeletion mutantを作成した。更に作成した変異体それぞれについて、STAT5レポーターアッセイによるin vitro増殖シグナル活性化能、レトロウイルスを用いた骨髄移植マウスモデルによるin vivo造腫瘍能、について評価を行った。その結果、変異アミノ酸配列の中から、in vitro増殖シグナル活性化に必要な部分、in vivo造腫瘍能に必要な部分を見出すことができた。
2020年度はこれらの成果を発展させ、変異造血幹細胞を標的とした治療モデルの開発や、in vivo腫瘍能を担う変異アミノ酸配列を標的とした治療法開発、などを進めていく予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
CALR変異造血幹細胞(hematopietic stem cells:HSCs)のクローン拡大機序に関して、マウスモデルを用いてCalr遺伝子のヘテロ欠損がHSCsの競合再構築能を亢進させること、そしてCalrヘテロ欠損がCALR変異をHSCsのクローン拡大能を強化することを示すことができた。論文もBlood誌にアクセプトされ、初年度予定していた研究計画どおりの進抄状況となっている。
CALR変異蛋白による増殖シグナル活性化機序に関しても、予定していた計画に沿い実験が進んでいる。
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| Strategy for Future Research Activity |
CALR変異造血幹細胞(hematopietic stem cells:HSCs)のクローン拡大機序に関しては、初年度の結果を踏まえ、HSCs分画のRNAseq解析を進めている。2020年秋までに、結果の解析を完了し、HSCsクローン拡大に寄与するpathwayの治療標的化を目的とした実験を開始する予定である。
CALR変異蛋白による増殖シグナル活性化機序に関しては、変異タンパクについて、in vitroの増殖シグナル活性化能の維持に必要な部分と、in vivo造腫瘍能の維持に必要な部分は一致していないことがわかった。今後は、初年度に同定したin vivo造腫瘍能に必須な部分について、その機能の解明や、機能抑制についての検討を進めていく。
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[Journal Article] TP53 and PTEN Mutations Were Shared in Concurrent Germ Cell Tumor and Acute Megakaryoblastic Leukemia2020
Author(s)
Keiichi Akizuki, Masaaki Sekine, Yasunori Kogure, Takuro Kameda, Kotaro Shide, Junji Koya, Ayako Kamiunten, Yoko Kubuki, Yuki Tahira, Tomonori Hidaka, Takumi Kiwaki, Hiroyuki Tanaka, Yuichiro Sato, Hiroaki Kataoka, Keisuke Kataoka & Kazuya Shimoda
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Journal Title
BMC Cancer
Volume: 20
Pages: 5
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Monocyte-derived fibrocytes elimination had little contribution on liver fibrosis2019
Author(s)
Ozono Y., Shide K., Toyoshima F., Takaishi Y., Tsuchimochi M., Kamiunten A., Kameda T., Nakamura K., Miike T., Kusumoto K., Iwakiri H., Hasuike S., Nagata K., Sawaguchi A., Shimoda K.
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Journal Title
Hepatobiliary Pancreat Dis Int .
Volume: 18
Pages: 348-353
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Vitamin D Receptor-Mediated Skewed Differentiation of Macrophages Initiates Myelofibrosis and Subsequent Osteosclerosis2019
Author(s)
Kanako Wakahashi, Kentaro Minagawa, Yuko Kawano, Hiroki Kawano, Tomohide Suzuki, Shinichi Ishii, Akiko Sada, Noboru Asada, Mari Sato, Shigeaki Kato, Kotaro Shide, Kazuya Shimoda, Toshimitsu Matsui and Yoshio Katayama
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Journal Title
Blood
Volume: 133
Pages: 1619-1629
DOI
Peer Reviewed
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[Presentation] The Role of Calreticulin in Normal Hematopoiesis and Neoplastic Hematopoiesis of Myeloproliferative Neoplasms2019
Author(s)
Kotaro Shide, Takuro Kameda, Ayako Kamiunten, Yoshinori Ozono, Yuki Tahira, Masaaki Sekine, Masaya Ono, Takako Yokomizo, Sho Kubota, Keiichi Akizuki, Yoko Kubuki, Tomonori Hidaka, Goro Sashida, Kazuya Shimoda
Organizer
American Society of Hematology the 61st Annual Meeting and Exposition
Int'l Joint Research
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[Presentation] Depletion of Neoplastic CD11b Positive Cells in Jak2V617F Mutant Mice Reduced Fibrocytes in Bone Marrow and Improved Myelofibrosis2019
Author(s)
Yoshinori Ozono, Kotaro Shide, Takuro Kameda, Ayako Kamiunten, Yuki Tahira, Masaaki Sekine, Keiichi Akizuki, Kenichi Nakamura, Hisayoshi Iwakiri, Tomonori Hidaka, Yoko Kubuki, Satoru Hasuike, Fumiyo Toyoshima, Akira Sawaguchi, Kenji Nagata, Kazuya Shimoda
Organizer
American Society of Hematology the 61st Annual Meeting and Exposition
Int'l Joint Research
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