血小板が関与する新たな肺線維化機構の解明と治療標的としての可能性

2021 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 19K08834
• Research Institution: University of Yamanashi
• Principal Investigator: 築地 長治 山梨大学, 大学院総合研究部, 講師 (20710362)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 井上 克枝 山梨大学, 大学院総合研究部, 教授 (10324211) ; 佐藤 篤靖 京都大学, 医学研究科, 講師 (30706677) ; 佐藤 晋 京都大学, 医学研究科, 特定准教授 (40378691)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 血小板 / 肺線維化 / CLEC-2

Outline of Annual Research Achievements

我々は、肺発生において血小板活性化受容体CLEC-2とそのリガンドPdpnの相互作用がalveolar duct myofibroblastの分化を通じて正常な肺呼吸に寄与していることを明らかにしたが、出生後成長に伴って当該細胞は消失してしまう。我々は、成体において不適切なCLEC-2/Pdpnシグナルの活性化が肺線維化の原因となるmyofibroblastを生みだし、線維化を増悪させるではないかと考えた。そこで、ブレオマイシンによる特発性肺線維症のモデルマウスにおいて抗CLEC-2抗体によって血小板CLEC-2を消失させたところ、体重減少と死亡率の改善およびコラーゲン量の減少が認められた。しかしながら、この実験系に問題があり、それを回避して再度解析したところ
肺線維化軽減効果は低下して有意な差が得られなかった。つまり、抗CLEC-2抗体による肺線維化軽減効果は、血小板CLEC-2欠損＋血小板減少に起因する可能性が示唆された（昨年度まで）。今年度は血小板自体の重要性についての解析に切り替え計画を進めた。血小板上の受容体発現を変化させることなく、血小板数のみを減少させることが可能な抗GPIb抗体を肺線維化モデルマウスに投与して効果を検証した。しかしながら、肺線維化軽減効果は確認できなかった。おそらく継続的な著しい血小板減少は出血を誘発してしまい、別の増悪因子となってしまう可能性が示唆された。出血起こさない程度に血小板数を低いレベル（正常のおよそ25%）で維持することを抗GPIb抗体の用量を変えることで実現可能か調査したが、頻回の血小板数計測による血液喪失や個体差による血小板数の変化の度合いの違いなどから極めて困難であった。その他、血小板減少を誘導可能とされる薬剤の投与も試したが、投与経路や溶解の条件の確立に苦慮し血小板減少を確認できなかったため肺線維化モデルマウスに対する実験は実施できなかった。

Research Products

• [Journal Article] CLEC‐2 stimulates IGF‐1 secretion from podoplanin‐positive stromal cells and positively regulates erythropoiesis in mice (2021)
  • Author(s): Otake Shimon、Sasaki Tomoyuki、Shirai Toshiaki、Tsukiji Nagaharu、Tamura Shogo、Takano Katsuhiro、Ozaki Yukio、Suzuki‐Inoue Katsue
  • Journal Title: Journal of Thrombosis and Haemostasis Volume: 19 Pages: 1572～1584
  • DOI: 10.1111/jth.15317
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Heme activates platelets and exacerbates rhabdomyolysis-induced acute kidney injury via CLEC-2 and GPVI/FcRγ (2021)
  • Author(s): Oishi Saori、Tsukiji Nagaharu、Otake Shimon、Oishi Naoki、Sasaki Tomoyuki、Shirai Toshiaki、Yoshikawa Yuri、Takano Katsuhiro、Shinmori Hideyuki、Inukai Takeshi、Kondo Tetsuo、Suzuki-Inoue Katsue
  • Journal Title: Blood Advances Volume: 5 Pages: 2017～2026
  • DOI: 10.1182/bloodadvances.2020001698
• [Journal Article] ヘミンはCLEC-2とGPVI/FcRγを介して血小板を活性化し、横紋筋融解による急性腎障害を悪化させる (2021)
  • Author(s): 大竹 志門, 大石 沙織, 築地 長治, 大石 直輝, 佐々木 知幸, 白井 俊光, 高野 勝弘, 近藤 哲夫, 井上 克枝
  • Journal Title: 日本透析医会雑誌 Volume: 36 Pages: 141-145
• [Presentation] リンパ管内皮と血小板の相互作用による胎生期器官形成機構 (2021)
  • Author(s): 築地長治
  • Organizer: 第94回日本生化学会大会
  • Invited
• [Presentation] CLEC-2はPDPN発現間質細胞からのIGF-1分泌を促進し、赤血球造血を正に制御する (2021)
  • Author(s): Otake, S. Sasaki, T. Shirai, T. Tsukiji, N. Tamura, S. Takano, K. Ozaki, Y. Suzuki-Inoue, K.
  • Organizer: 第83回日本血液学会学術集会
• [Presentation] Heme Activates Platelets and Exacerbates Rhabdomyolysis-Induced Acute Kidney Injury via CLEC-2 and GPVI/FcRγ (2021)
  • Author(s): S. Oishi, N. Tsukiji, S. Otake, N. Oishi, T. Sasaki, T. Shirai, Y. Yoshikawa, K. Takano, H. Shinmori, T. Inukai, T. Kondo, K. Suzuki-Inoue
  • Organizer: 第28回国際血栓止血学会
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] 横紋筋融解症に併発する腎障害における血小板CLEC-2及びGPVIの役割 (2021)
  • Author(s): S. Oishi, N. Tsukiji, S. Otake, N. Oishi, T. Sasaki, T. Shirai, Y. Yoshikawa, K. Takano, H. Shinmori, T. Inukai, T. Kondo, K. Suzuki-Inoue
  • Organizer: 第43回日本血栓止血学会