2022 Fiscal Year Research-status Report
生体内ゲノム編集を利用したHTLV-1を標的にする新規抗ウイルス療法
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19K08870
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| Research Institution | Kagoshima University |
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Principal Investigator |
鈴木 紳介 鹿児島大学, 鹿児島大学病院, 特例講師 (20437974)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
上野 真一 鹿児島大学, 医歯学総合研究科, 特任教授 (40322317)
石塚 賢治 鹿児島大学, 医歯学域医学系, 教授 (10441742)
魚住 公治 独立行政法人国立病院機構鹿児島医療センター(臨床研究部), 内科, 副院長・部長 (90253864)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | HTLV-1 / bZIP factor / ゲノム編集 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ヒト T 細胞白血病ウイルス I 型 (Human T cell leukemia virus type I: HTLV-1) 由来の遺伝子を標的にし、体内ゲノム編集を利用した新規抗ウイルス療法の 確立を目的とする。すべての HTLV-1 感染細胞で、3’側プロウイルスである、HTLV-1 bZIP factor (HBZ) 遺伝子は保存されいる。clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR) /CRISPR-associated 9 (Cas9)システムは、感染細胞のゲノムに組込まれ、発現し続けるHBZ遺伝子を極めて 効率的に機能失活させうるゲノム編集ツールである。
HBZ を標的にし機能失活を目的とした、2つのCRISPR/Cas9 guideRNAsを作成した。
HTLV-1感染T細胞株と低悪性度ATL患者白血病細胞を用いて、HBZを標的にしたCRISPR/Cas9 gRNAsを導入し、HBZ の欠失変異と変異効率を解析中である。
HTLV-1感染T細胞株にNOTCH1蛋白が過剰発現しているが、阻害薬が増殖を抑制しないことを報告した。
一方、HBZ mRNAは、蛋白質をコードするだけではなく、機能を有するbifunctional RNAであることも示されている。HBZを標的にしたCRISPR/Cas9 gRNAsを導入した、CMVプロモーター依存性アデノウイルスベクターも作成中である。 感染細胞のゲノムに組込まれ、発現し続けるHBZ遺伝子をCRISPR/Cas9 ゲノム編集ツールを用いて、極めて効率的に機能失活させることが、発がんウイルスへの 抗ウイルス療法の確立に重要と考えている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
COVID19のパンデミック影響もあり、低悪性度ATL患者白血病細胞の検体収集が滞っている。今後も患者検体の収集は困難なことが予想される。
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| Strategy for Future Research Activity |
HTLV-1感染T細胞株で代用し研究を推進する。
細胞株は培養の過程で、多数の遺伝子変異が蓄積しており、HBZ 遺伝子への依存度は低下していることも予想される。更にHBZ mRNAは、bifunctional RNAであることも視野に入れておく必要がある。
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| Causes of Carryover |
COVID19のパンデミック影響もあり、低悪性度ATL患者白血病細胞の検体収集が滞っているため、現在までの進捗状況に遅れが生じている。また学会での発表機会 も減少している。今後も患者検体の収集は困難なことが予想されるのでHTLV-1感染T細胞株で代用し研究を推進する際の消耗品・試薬の購入に用いる。また外部 検査会社への委託注文も利用する。
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Research Products
(1 results)
