単球で合成されるプロトロンビンが関与する抗リン脂質抗体産生機序の解明

2019 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K08876
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 藤枝 雄一郎 北海道大学, 大学病院, 助教 (70790872)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 抗リン脂質抗体症候群 / 抗原提示 / プロトロンビン

Outline of Annual Research Achievements

向血栓細胞である単球が合成したプロトロンビン(PT)蛋白を、PT/MHC class II複合体として抗原提示し、その複合体を抗リン脂質抗体であるホスファチジルセリン依存性抗ヒトプロトロンビン抗体（aPS/PT）が認識することで、血栓発症の病態に関わるのではないかと仮説を立て、下記実験を行なった。実験1は PTとMHC class IIを強制発現したHEK293T細胞を用いて、PT/ MHC class II複合体が細胞表面に輸送されるかを抗PT抗体とaPS/PT を用いて、フローサイトメリー(FCM)で確認した。Phorbol-12-myristate-13-acetate (PMA)刺激下でヒト単球細胞（THP1）において、PTのmRNAおよびタンパクが発現すること、さらにPMAで刺激したTHP1およびAPS患者の単球は、抗PT抗体よりも、aPS/PTと強い結合を示すことを確認した。単球でPTが合成される現象が、APSにおいて血栓の契機となるのかを明らかにするためにPTを合成した単球を用いてトロンビン産生能を組織因子の発現、ROTEM(rotational thromboelastometry)で行った。組織因子の発現は確認できたが、ROTEMでは明らかなトロンビン産生の更新は確認できなかった。
これまでPTは肝臓で合成される凝固タンパクとされていたが、以上の結果より単球でもPTが合成され、さらに単球が合成するPTがaPS/PTの抗原である可能性が高いことが示唆された。単球と肝臓で合成されるPTの違いがaPS/PTのantigenicityに寄与しているかどうか、プロトロンビンを合成する単球がAPSの病態にどのように関わっているのかを今後さらに検討を進める。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

プロトロンビン合成単球という新たな単球サブセットが発見された。プロトロンビン合成単球の割合、機能などを検討する予定である。

Strategy for Future Research Activity

抗リン脂質抗体症候群の患者でプロトロンビン合成単球が存在する患者の特徴を明らかにする。治療前後でのプロトロンビン合成単球の割合の変化を確認する。

Research Products

• [Journal Article] Factor Xa inhibitors for preventing recurrent thrombosis in patients with antiphospholipid syndrome: a longitudinal cohort study (2019)
  • Author(s): Sato T、Nakamura H、Fujieda Y、Ohnishi N、Abe N、Kono M、Kato M、Oku K、Bohgaki T、Amengual O、Yasuda S、Atsumi T
  • Journal Title: Lupus Volume: 28 Pages: 1577～1582
  • DOI: 10.1177/0961203319881200
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Has lupus anticoagulant testing had its day? (2019)
  • Author(s): Fujieda Yuichiro、Atsumi Tatsuya
  • Journal Title: Nature Reviews Rheumatology Volume: 15 Pages: 324～325
  • DOI: 10.1038/s41584-019-0218-6
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Circulating plasmablasts contribute to antiphospholipid antibody production, associated with type I interferon upregulation (2019)
  • Author(s): Hisada RYO、Kato Masaru、Sugawara ERI、Kanda Masatoshi、Fujieda Yuichiro、Oku Kenji、Bohgaki Toshiyuki、Amengual Olga、Horita Tetsuya、Yasuda Shinsuke、Atsumi Tatsuya
  • Journal Title: Journal of Thrombosis and Haemostasis Volume: 17 Pages: 1134～1143
  • DOI: 10.1111/jth.14427
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Prothrombin/MHC class II complexes on procoagulant cells are novel immune target for pathogenic antiphospholipid antibodies (2019)
  • Author(s): Ohnishi N, Fujieda Y, Kono M, Kato M, Oku K, Bohgaki T, Amengual O, Yasuda S, Hisashi Arase, Atsumi T.
  • Organizer: 16th International Congress on Antiphospholipid Antibodies (ICAPA)
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] The prothrombin/MHC class II complexes on procoagulant cells as the novel immune target for pathogenic antiphospholipid antibodies (2019)
  • Author(s): Ohnishi N, Fujieda Y, Kono M, Kato M, Oku K, Bohgaki T, Amengual O, Yasuda S, Hisashi Arase, Atsumi T
  • Organizer: The International Society on Thrombosis and Hemostasis (ISTH)
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Discrimination of intracranial vasculitis from thrombotic antiphospholipid syndrome in lupus patients with antiphospholipid antibodies. (2019)
  • Author(s): Aso K, Fujieda Y, Sato T, Ohnishi N, Kono M, Kato M, Oku K, Amengual O, Yasuda S, Atsumi T
  • Organizer: 16th International Congress on Antiphospholipid Antibodies (ICAPA)
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] IgM antiphospholipid antibodies: long term follow-up and thrombotic risk. (2019)
  • Author(s): Sato T, Amengual O, Fujieda Y, Nakamura H, Ohnishi N, Abe N, Kono Michihito, Kato M, Oku K, Bohgaki T, Yasuda S, Atsumi T
  • Organizer: The International Society on Thrombosis and Hemostasis (ISTH)
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Longitudinal efficacy and safety of direct factor Xa inhibitors. in patients with antiphospholipid syndrome. (2019)
  • Author(s): Sato T, Amengual O, Fujieda Y, Nakamura H, Ohnishi N, Abe N, Kono Michihito, Kato M, Oku K, Bohgaki T, Yasuda S, Atsumi T.
  • Organizer: The 16th International Congress on Antiphospholipid Antibodies
  • Int'l Joint Research