2020 Fiscal Year Research-status Report
Progressing factors of nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) by gene analysis of serial liver biopsies.
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19K08975
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| Research Institution | Kanazawa University |
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Principal Investigator |
竹下 有美枝 金沢大学, 医学系, 准教授 (40507042)
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2019-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | 非アルコール性脂肪性肝疾患 / 連続肝生検 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
NAFLD合併2型糖尿病患者を対象に、同等にA1cを低下させながら、インスリン値を低下させるSGLT2阻害薬及び上昇させるSU薬、各々が肝病理とエネルギー代謝に及ぼす効果を比較検討した。
臨床/病理学的にNAFLDと診断された2型糖尿病患者をグリメピリド0.5㎎（SU群）あるいはトホグリフロジン20mg（SG群）に無作為割り付けし、48週間治療した。治療前後に肝生検を施行し、肝脂肪化、炎症、線維化をスコア化し、グルコ-スクランプ検査を含む各種代謝マ-カ-の測定を行った。主要評価項目は肝組織スコア。サンプルサイズは40例と算出した。
48週投与後、SG群では、Steatosis (1.80 ± 0.07 → 1.00 ± 0.80, P=0.008)、Lobular inflammation (1.40 ± 0.68 → 0.80 ± 0.41, P=0.001)、Ballooning (1.20 ± 0.70 → 0.55 ± 0.61, P=0.000)、Fibrosis (1.45 ± 0.89 → 0.75 ± 0.97, P=0.000)はいずれも有意に軽減した。SU群ではBallooningスコアのみ有意に低下した。HbA1cはともに有意に低下 (SG群 8.1 ± 1.1 → 6.9± 0.9 %, P=0.002；SU群 8.3 ± 1.3 → 7.4 ± 0.9%, P=0.001)。体重は、SU群で変化せず、SG群で有意に低下(79.8 ± 18.2 → 75.2 ± 17.6 kg, P=0.000)。肝酵素値は、SU群で変化せず、SG群で有意に低下（AST: 42.2 ± 28.5→ 25.5 ± 17.0 IU/L、ALT: 59.4 ± 46.7 → 30.8 ± 23.6 IU/L）。脂質は両群ともに変化なし。
SUとSGは48週後に同等にA1cを低下させたが、SGのみが体重・肝酵素・肝病理スコアを有意に低下させた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
1998年以降に臨床的にNAFLDと診断され、2回以上の連続肝生検を施行した患者118名(男性67名、女性51名)を最長15年(平均3.8±3.5年)観察した。延べ342回の肝生検サンプルの病理像をMatteoni分類およびBrunt分類に従って、一人の病理医により系統的に再スコア化した。一般線形混合モデルを用いて、NAFLD病理の時間的・組織学的変化と性別、年齢、BMI(body mass index)、糖尿病病態（HbA1c、血液生化学データ、糖尿病治療）等の臨床パラメーターとの関連を解析し、肝線維化進展と関連する因子を抽出することができた。
今年度は、NAFLD有する2型糖尿病患者に経口糖尿病治療薬を48週間投薬し、治療前後に肝生検を施行し肝脂肪化、炎症、線維化をスコア化し、グルコ-スクランプ検査を含む各種代謝マ-カ-の測定を行う前向き臨床研究の40症例が終了した。今後肝臓の生検時に得られた肝臓サンプルから肝臓の発現遺伝子解析をすすめ、薬剤間の肝臓の代謝の相違を明らかにすることが可能な状態にある。
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| Strategy for Future Research Activity |
HbA1c、血液生化学データ、インスリン分泌能、人工膵臓を用いた高インスリン血症下正常血糖クランプ試験で求めた臓器特異的インスリン抵抗性、核磁気共鳴スペクトロスコピー（MRS)とインピーダンス法で求めた臓器特異的細胞内脂肪蓄積、血中ヘパトカインレベル、糖尿病治療を含む臨床データと肝病理像推移との関連性を明らかにする。
凍結肝生検組織および末梢血液細胞からRNAを抽出し、遺伝子発現を次世代シーケンサーRNA Seqを用いて網羅的に既知遺伝子の発現解析を行う。また、配列情報から新規の転写産物やスプライシングジャンクションの探索を合わせて行う。さらに、リアルタイムPCR法を用いて糖脂質代謝、炎症・免疫応答、線維化などのNAFLDの病態に関与する遺伝子群や同定した遺伝子群の変化を検討する。
ヘパトカインSelenoprotein PおよびLECT2を測定し、ヘパトカイン推移とNAFLD病理推移の関連性を検討する。
肝病理像推移と関連するエネルギー代謝パスウェイ（解糖系、脂肪酸酸化、ミトコンドリアOXPHSなど）に属する遺伝子群の主成分分析により、肝組織学的変化と糖代謝を中心としたエネルギー代謝変化の関連を解析する。
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| Causes of Carryover |
コロナ禍にあり予定していた学会発表予定としていた旅費が未使用となった。組織免疫染色用抗体行うために計上した予算が一部未使用となった。今後、旅費、ヘパトカイン測定、遺伝子解析の関連試薬に使用する。
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[Journal Article] Alcohol Intake Is Associated With Elevated Serum Levels of Selenium and Selenoprotein P in Humans.2021
Author(s)
Isobe Y, Asakura H, Tsujiguchi H, Kannon T, Takayama H, Takeshita Y, Ishii KA, Kanamori T, Hara A, Yamashita T, Tajima A, Kaneko S, Nakamura H, Takamura T.
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Journal Title
Front Nutr.22;8:633703
Volume: 22
Pages: 633703
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] LECT2 as a hepatokine links liver steatosis to inflammation via activating tissue macrophages in NASH.2021
Author(s)
Takata N, Ishii KA, Takayama H, Nagashimada M, Kamoshita K, Tanaka T, Kikuchi A, Takeshita Y, Matsumoto Y, Ota T, Yamamoto Y, Yamagoe S, Seki A, Sakai Y, Kaneko S, Takamura T.
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Journal Title
Sci Rep.
Volume: 12
Pages: 555
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Study Protocol for Pleiotropic Effects and Safety of Sodium-Glucose Cotransporter 2 Inhibitor Versus Sulfonylurea in Patients with Type 2 Diabetes and Nonalcoholic Fatty Liver Disease2020
Author(s)
Takeshita Y, Kanamori T, Tanaka T, Kaikoi Y, Kita Y, Takata N, Iida N, Arai K, Yamashita T, Harada K, Gabata T, Nakamura H, Kaneko S, Takamura T.
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Journal Title
Diabetes Ther.
Volume: 11
Pages: 549-560
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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