2020 Fiscal Year Research-status Report
炭酸脱水酵素5 (Car8)によるGLP-1分泌制御機構の解明
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19K08977
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
山根 俊介 京都大学, 医学研究科, 助教 (90582156)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | インクレチン分泌 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
[方法]①Car8の局在に関して、単離L細胞のRT-PCRおよびGcggfp/+下部小腸の免疫組織学的検討を行った。②腸管内分泌細胞株STC-1細胞を用いて、各種分泌刺激に対するGLP-1分泌を、siRNAを用いたCar8発現抑制下および発現ベクター導入による過剰発現下で評価した。③脂肪酸刺激時STC-1細胞内カルシウム濃度の変化をsiRNAを用いたCar8発現抑制下で評価した。④Car8機能欠失型変異を有するCar8wdl マウスで、経口油脂投与時血中GLP-1濃度を野生型マウスと比較した。[結果]RT-PCRではL細胞におけるCar8発現は非L細胞に比較して有意に高値であり、免疫染色でもGcggfp/+マウス下部小腸ではGFPとCar8が共染することを確認した。リノール酸やα-リノレン酸といった長鎖脂肪酸刺激によるSTC-1細胞からのGLP-1分泌は、Car8の発現抑制により増強、過剰発現によって低下した。一方短鎖脂肪酸、胆汁酸、oleoylethanolamide (OEA)によるGLP-1分泌はCar8の発現抑制による影響を受けなかった。またα-リノレン酸刺激時STC-1細胞内カルシウム濃度の上昇がCar8発現の抑制により有意に増加した。さらにCar8機能欠失型変異を有するCar8wdl マウスでは、経口糖負荷時のGLP-1分泌は野生型マウスと比べて差を認めなかったのに対して、α-リノレン酸を豊富に含むエゴマ油投与時GLP-1分泌が野生型マウスに比べて有意に高値であった。Car8欠損マウスの腸管蠕動や腸管GLP-1含量は野生型マウスと有意な差を認めなかった。[総括] Car8は細胞内カルシウム濃度の調節を介して、長鎖脂肪酸誘導性GLP-1分泌の制御に関与することが示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
ほぼ当初の実験計画通りに進めており、得られた結果を英文誌に投稿、受理された。
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| Strategy for Future Research Activity |
既に得られた実験結果を踏まえ、当初の実験計画に沿って遂行する。特に新規の技術習得や機材等の必要性はなく、研究計画を推進するうえで現段階では特に課題等を認めない。
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Research Products
(2 results)
