ACTH産生下垂体腺腫の浸潤性、増殖性と関連するCRNDEの機能の解明

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K09003
• Research Institution: Kobe University
• Principal Investigator: 福岡 秀規 神戸大学, 医学部附属病院, 講師 (80622068)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 高橋 裕 神戸大学, 医学研究科, 准教授 (70301281) ; 山田 正三 (財)冲中記念成人病研究所, その他部局等, 研究員 (80260131) ; 青井 貴之 神戸大学, 科学技術イノベーション研究科, 教授 (00546997)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: クッシング病 / オルガノイド / 長鎖ノンコーディングNRA

Outline of Annual Research Achievements

CRNDEのうち、アイソフォームバリアント２の発現がクッシング病に多いことを確認した。このことからバリアント２(CRNDE-V2）をクローニングしてpLVSIN-CMV Purベクターに組み込み、CRNDE-V2発現レンチウイルスベクターを作成した。AtT20細胞株の2D培養を用いて、このウイルスベクターによりCRNDE-V2の発現をreal time-PCR法で確認した。
現在このpLVSIN-CMV-CRNDE-V2 Purベクターを用い、ACTH産生下垂体腺腫術後検体から作成したオルガノイドにトランスダクションし、その増殖性、ACTH分泌の変化を現在検討している。オルガノイドへのトランスダクションは困難なケースも多く、貴重な術後サンプルであることから、まずはヒト異所性ACTH産生症候群患者の腫瘍から単離された細胞株であるDMS79を用いてトランスダクションと、増殖能、ACTH分泌能についての検討を行っている。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

COVID-19により実験ができなくなった点、また、下垂体に対する手術が制限されており、術後検体を用いた実験が制限されている点が挙げられる。

Strategy for Future Research Activity

クッシング病患者術前後の血液検体からエクソソームを抽出し、そこに含まれるCRNDEの量に変化を生じるかについて検討する。

Causes of Carryover

COIVID-19の影響により、手術検体が少なかったため次年度に繰り越しとした。

Research Products

• [Journal Article] Tumor shrinkage by metyrapone in Cushing's disease exhibiting glucocorticoid-induced positive feedback (2021)
  • Author(s): Yasutaka Tsujimoto, Hiroki Shichi, Hidenori Fukuoka, Masaaki Yamamoto, Itsuko Sato, Takamitsu Imanishi, Tomoaki Nakamura, Naoko Inoshita, Atsushi Ishida, Shozo Yamada, Yutaka Takahashi, Kazuo Chihara
  • Journal Title: Journal of the Endocrine Society Volume: 5 Pages: bvab055
  • DOI: 10.1210/jendso/bvab055
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Share The Mechanisms Underlying Autonomous Adrenocorticotropic Hormone Secretion in Cushing's Disease. (2020)
  • Author(s): Fukuoka H, Shichi H, Yamamoto M, Takahashi Y.
  • Journal Title: Int J Mol Sci. Volume: 21 Pages: 9132
  • DOI: 10.3390/ijms21239132.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Share Patients with pheochromocytoma exhibit low aldosterone renin ratio-preliminary reports. (2020)
  • Author(s): Yamada T, Fukuoka H, Hosokawa Y, Odake Y, Yoshida K, Matsumoto R, Bando H, Okada Y, Hirota Y, Iguchi G, Ogawa W, Takahashi Y.
  • Journal Title: BMC Endocr Disord. Volume: 20 Pages: 140
  • DOI: 10.1186/s12902-020-00620-6.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Adrenal Corticomedullary Mixed Tumor Associated With the FGFR4-G388R Variant. (2020)
  • Author(s): Kanzawa M, Fukuoka H, Yamamoto A, Suda K, Shigemura K, Hara S, Imagawa N, Tsukamoto R, Aoyama Y, Nakamura Y, Fujisawa M, Ogawa W, Takahashi Y, Itoh T.
  • Journal Title: J Endocr Soc Volume: 4 Pages: bvaa101
  • DOI: 10.1210/jendso/bvaa101.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] The impact of adrenal tumor multidisciplinary team meetings on clinical outcomes. (2020)
  • Author(s): Fukuoka H, Shigemura K, Kanzawa M, Kanda T, Yamamoto M, Kitagawa K, Sakamoto M, Iguchi G, Ogawa W, Fujisawa M, Takahashi Y
  • Journal Title: Endocrine. Volume: 69 Pages: 519
  • DOI: 10.1007/s12020-020-02361-x. Epub 2020 Jul 23.
  • Peer Reviewed