2021 Fiscal Year Annual Research Report
Nrf2を介した間葉系幹細胞から肝細胞への分化誘導法の開発
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19K09094
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| Research Institution | The University of Tokushima |
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Principal Investigator |
高須 千絵 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(医学域), 講師 (70582823)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
齋藤 裕 徳島大学, 病院, 講師 (50548675)
森根 裕二 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(医学域), 准教授 (60398021)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | Nrf2 / HCLC |
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| Outline of Annual Research Achievements |
【R1】2D culture、3D culture: cell saicを用いて培養。(1)3-stepで2D culture、3D cultureともにADSCの分化の確認。(2)培養5日目の細胞においてStemness genes である OCT4, SOX2の発現は低下し、endoderm cell markerのSOX17、AFP、ALBの上昇を確認した。(3)培養11日目から21日目において、CYP3A4 luciferase activityは著明に増加し、アルブミン分泌能、アンモニア代謝能が保持されていることを確認した。アルブミン分泌能、アンモニア代謝能は2D培養に比し、3D培養の方が機能が高いことを確認した。
【R2】HLC分化におけるNrf2の発現検討。(1)各STEPにおけるNrf2発現の比較。IFを用いて、Nrf2のtranslocationを評価した。(2)STEP2において、著明なNrf2の活性化（translocation）を認めた。(3)3D HLCでは2Dほどの明らかなtranslocationは認めなかった。
【R3】HLC分化におけるNrf2の役割の解明。(1)2DHLCでsiNrf2では、HLC分化までの期間は通常の21日ではなく、24日要した。(2)Step 1において胚葉転換誘導としてNrf2活性化作用をもつGSK3阻害剤ではなく、一般的に用いられているActivin Aを使用。Activin AではNrf2の核内移行はGSK3阻害剤使用群に比し著明に低かった。また、CYP3A活性は、GSK3阻害剤使用群で最も高く、Nrf2をKOするとGSK3阻害剤を使用してもActivin A使用群と同レベルまで活性は低下した。
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Research Products
(1 results)
