2019 Fiscal Year Research-status Report

A novel cancer immunotherapy focused on organ specific immune memory generation

Research Project

Project/Area Number	19K09147
Research Institution	Kobe University
Principal Investigator	山下公大神戸大学, 医学部附属病院, 特命准教授 (80535427)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	井上茂亮神戸大学, 医学研究科, 特命教授 (30582209) 藤田貢近畿大学, 医学部, 准教授 (40609997) 眞庭謙昌神戸大学, 医学研究科, 教授 (50362778) 掛地吉弘神戸大学, 医学研究科, 教授 (80284488) 高村史記近畿大学, 医学部, 講師 (90528564)
Project Period (FY)	2019-04-01 – 2022-03-31
Keywords	CD8 T細胞 / NKT細胞 / インフルエンザワクチン / レジデントメモリーT細胞 / 腫瘍浸潤リンパ球
Outline of Annual Research Achievements	本研究は、皮下接種型腫瘍に対し著効するNKT細胞ワクチンベクター免疫療法に抵抗性を示す難治性転移性肺腫瘍に対し、レジデントメモリー T細胞の誘導環境を利用して有効な腫瘍反応性T細胞を成立させ、肺の臓器全体の転移制御を行う新規癌免疫療法のモデルを確立することが目的である。この際に機能する、レジデントメモリー様腫瘍浸潤T細胞の誘導機構を明らかにし、臓器別に制御する免疫療法の開発に応用する。肺転移に対して、NKT細胞ワクチンベクターにより肺メモリーT細胞を形成させることは、可能であるが、これには治療抵抗性を示す為に、これに関連した、ウイルスおよびワクチンを用いた感染モデルを併用(NKT細胞腫瘍ワクチンベクターと感染ワクチンの併用)することにより、治療効果の高いレジデントメモリー様腫瘍浸潤T細胞へと分化、誘導させ、治療モデルを開発すると言うコンセプトで行うものある。レジデントメモリー様腫瘍浸潤T細胞は強力なエフェクター機能と免疫チェックポイント阻害剤に高反応性であることが示されており、治療上重要であり、薬剤による介入の可能性を高めるものである。この治療開発においては、重要な点は次の２点である。まず、我々の開発したワクチンベクター作成の安定的な供給である。大量の培養樹状細胞にモデル抗原タンパクを導入するので、安定した作成方法の確立が必要である。また、レジデントメモリー様腫瘍浸潤T細胞の誘導条件をこのモデル及びヒトの切除標本を用いて、明らかにすることが必要であると考えている。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 3: Progress in research has been slightly delayed. Reason 肺レジデントメモリーT細胞誘導可能環境(インフルエンザウイルス感染併用)での、樹状細胞にOVA蛋白を導入し、α-galactosylceramideを付加したNKT活性化ワクチンベクターであるDC/Gal-OVAを用いた肺転移モデルに対する治療効果の検証する。DC/Gal-OVA単独群での治療効果は転移性肺腫瘍の治療モデルでの確認を行なっており、肺での特異的T細胞の検出が可能となっとなっている。実際、ワクチンベクター作成の精度管理と言う問題点が生じ、その点から検証している。インフルエンザウイルスワクチン併用モデルの検証に関する実験計画の現在、申請中である。皮下接種治療後のT細胞の機能解析を行う。皮下接種型腫瘍での有効なTIL、DC/Gal- OVA単独群の肺機能不全メモリー細胞の解析方法を確立し、解析を行っている。機能的解析として、細胞周期の評価、増殖能を検討している。また、機能的表面抗原の解析を行っており、CD103陽性細胞の解析を進めている。ヒト大腸癌の原発巣・転移巣切除標本のRM-like TIL及びNKT細胞の組織学的解析を行っている。ヒト大腸癌の原発巣と転移巣の切除標本のRM-like T I Lの検出として、CD103+CD8+の二重染色を行い、両陽性細胞を検出することが可能となった。現在は、染色を進めている段階で、検出及び評価の方法を確立し、症例解析とバイオマーカーとしての意義を検証している。
Strategy for Future Research Activity	インフルエンザワクチンの投与に関しては、共同研究先と連携を深め、効率的な誘導方法を検討している状況である。投与によるレジデントメモリー様T細胞の検出には既に成功しており、当施設での導入が先決である。また、ヒト検体免疫染色は、深層学習アルゴリズムを用いた病理診断を用いて行う予定である。より迅速で客観性の高いデータで解析を進める予定である。