癌関連線維芽細胞によるWntシグナル経路を介した大腸癌転移促進機構の解明

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K09188
• Research Institution: Tohoku University
• Principal Investigator: 武者 宏昭 東北大学, 医学系研究科, 大学院非常勤講師 (30724322)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 唐澤 秀明 東北大学, 大学病院, 助教 (30547401) ; 山村 明寛 東北大学, 大学病院, 助教 (30814678) ; 内藤 剛 東北大学, 医学系研究科, 准教授 (50291258) ; 大沼 忍 東北大学, 大学病院, 助教 (70451565)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 大腸癌 / 癌関連線維芽細胞 / Wntシグナル

Outline of Annual Research Achievements

本研究では手術検体よりCAFと正常線維芽細胞（NF）の初代培養を行い、CAFによる大腸癌の制御機構を解明する事を目的とした。5症例から得られたCAFとNFの遺伝子発現プロファイルを解析したところ、Wntシグナル経路に関連する遺伝子群がCAFで高発現しており、特にβ-カテニン非依存Wntシグナル経路に関連する遺伝子発現がCAFとNFで有意に異なる結果を得た。さらにβ-カテニン非依存経路のなかでWNT5AがCAFで高発現しており、CAFのWnt5a発現が癌組織において重要な働きを担っていることが示唆された。Wnt5aを介したCAFと癌細胞の相互作用を解析するため、in vitroでの機能解析および免疫組織化学による臨床病理学的検討を行った。Wnt5a特異的siRNAを用いてCAFのWnt5a発現を抑制し、大腸癌細胞株の遊走能を検討したところ、Wnt5a発現抑制により大腸癌細胞株の遊走能が低下する傾向を認めたが、有意差は認めなかった。続いてヒトリコンビナントWnt5aタンパク質を用いて大腸癌細胞株を刺激したときの増殖能・遊走能の変化を検討した。その結果大腸癌細胞株の増殖能および遊走能が有意に上昇した。免疫組織化学による検討では、Wnt5aは正常上皮細胞や癌細胞でも発現を認めたが癌組織の間質でより強い発現を認め、高発現群では、腫瘍径が有意に大きく、腫瘍の深達度が有意に深かった。また、リンパ管侵襲陽性例、静脈侵襲陽性症例、リンパ節転移陽性症例がWnt5a高発現群で有意に多く、TNM Stage III以上の症例も有意に多い結果であった。Stage I-III症例の140例について検討したところ、Wnt5a高発現群では手術後に再発した症例が有意に多かった。

Current Status of Research Progress

1: Research has progressed more than it was originally planned.

Reason

Wnt2に関しては既に英文誌に報告。Wnt5aに関して現在続報を投稿中である。

Strategy for Future Research Activity

さらに同所移植モデルを用いて、癌関連線維芽細胞の転移に関する検討を計画中である。