単純ヘルペスチミジンキナーゼ遺伝子導入Muse細胞を用いた肺癌脳転移新規治療戦略

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K09523
• Research Institution: Hamamatsu University School of Medicine
• Principal Investigator: 鮫島 哲朗 浜松医科大学, 医学部, 講師 (00295213)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小泉 慎一郎 浜松医科大学, 医学部附属病院, 助教 (10456577) ; 難波 宏樹 浜松医科大学, 医学部, 特命研究教授 (60198405) [Withdrawn]
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 自殺遺伝子療法 / 脱落乳歯歯髄幹細胞

Outline of Annual Research Achievements

脱落乳歯歯髄幹細胞(SHED)にレンチウイルスを用いてTKを導入して治療細胞を樹立した。治療細胞のganciclovirへの感受性を調べ3μg/ml程度の濃度でほとんどの治療細胞が死ぬことがわかった。肺癌細胞株(H1299, H460, A549)を用いて腫瘍細胞と治療細胞を3μg/mlのganciclovir存在下に様々な割合で共培養し、bystander効果による治療効果をin vitroで検証した。治療細胞:腫瘍細胞が1:32においても有意なbystander効果を認めた。特にH1299に対しては著名なbystander効果による抗腫瘍効果が確認できた。
ヌードマウスの脳にH1299を定位的に50000個注入して脳腫瘍モデルを作成した。H1299とSHED-TKを1:1で混合したもの、またはH1299を脳に注射し、それぞれの群をさらにganciclovirの有無で合計４群に分けてin vivoでのbystander効果を検証した。経時的な腫瘍体積はH1299にluc2を導入して作成した細胞を用いて生物学的発光を評価した。ganciclovirは細胞の植え込み翌日から50mg/kgを１日に２回投与した。H1299とSHED-TKを混合しganciclovirを投与した群(co-implantation+ganciclovir)では著名な腫瘍の減少を認め、day100までの死亡は認めなかった。controlの３群（co-implantation+PBS, H1299+ganciclovir, H1299+PBS）では腫瘍は増大し、40-50日程度で死亡した。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

論文化までの最低条件は概ね満たしているため

Strategy for Future Research Activity

今後は前もって作成した腫瘍モデルに対する治療効果を確認し、vivoでの腫瘍に対する治療細胞の遊走能を評価し、論文化する。

Causes of Carryover

ヌードマウスの購入および生物学的発光を測定するためのD-luciferinの購入を行なったため。