2019 Fiscal Year Research-status Report
神経内血流量制御に基づいた、難治性末梢神経障害に対する新規治療法の開発
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19K09612
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| Research Institution | Toho University |
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Principal Investigator |
越智 健介 東邦大学, 医学部, 研究員 (70445203)
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2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | 末梢神経 / 神経損傷 / 神経虚血 / 神経内血流 / ｂFGF |
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| Outline of Annual Research Achievements |
超高齢化社会の到来により、加齢によって難治化がすすむ難治性末梢神経障害に対する新規治療法の開発が喫緊の課題となっている。ヒト末梢神経内部の血流は均等ではなく、血流量に乏しい「分水嶺」が存在するという新知見を世界に先駆けて見出し、さらに虚血が神経再生を阻害することに着眼し、従来の治療法に「分水嶺部の血流改善」という要素を加えることで、難治性末梢神経障害に対する新規治療法を開発できるのではないかと着想した。
「神経内分水嶺内部への血管新生因子注入は、損傷神経の再生を促進させる」との独創的な仮説に基づいて、ラット急性神経損傷モデルの損傷神経に対して神経剥離術と分水嶺内（神経束間結合組織内）血管新生因子（塩基性線維芽細胞増殖因子：bFGF）注入を併用したところ、神経機能回復が有意に促進された。
本研究の目的は上記急性神経障害モデルに対する研究を完成させると同時に、慢性神経障害モデルに対しても同様の検証を加えることにより、 難治性末梢神経障害に対す新規治療法開発とその機序解明の基盤とすることである。
本研究では「分水嶺における神経内 血流量増加は、高齢者を含む難治性末梢神経障害患者の神経再生能力を増大させるのではないか」という従来にない学術的「問い」に基づき、以下のような仮説をたてた。A) 神経障害部近位の分水嶺部神経内（神経束間結合組織）への血管新生因子注入は、分水嶺部の虚血状態を改善させることで「軸索再生に有利な環境」を構築できる；B) 従来の外科的治療と A)の併用（神経剥離術や神経移植術の際、分水嶺部へ血管新生因子を注入する）により、難治性末梢神経障害の神経再生能力が促進される。これを応用することにより、ヒトの各種難治性末梢神経障害に対する有効な新規治療法開発が可能となる可能性が高い。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
先行研究を行い、実際にbFGFの分水嶺部神経内注入が急性神経損傷モデルの回復を有意に促進させることを明らかにしつつある。また1) 坐骨神経の直径が2mm以上のラットでは、水溶液200ulの神経内注入による影響が無視できる、2) bFGF100ugの分水嶺内注入は、ラット急性神経圧挫損傷モデルの回復を促進させうる、4)徐放剤の使用は治療効果を変えない、5) 慢性神経圧挫損傷モデルの圧挫時間は24時間以内が望ましい、などを予備実験にて確認した。
次に12週令のSDラットの坐骨神経に対して1)クリップ圧挫 (1.32N)＋神経剥離術(クリップ群)、2)クリップ圧挫＋神経剥離術後にPBS神経内注入(PBS群)、3) クリップ圧挫(1.32N)＋神経剥離術後にbFGF 100ug神経内注入(bFGF群)の3種の処置(各群 n=8)を行い下記の結果を得た。1)疼痛逃避行動評価(von Frey test)：クリップ群とPBS群では術後有意に閾値が低下したのに対し、bFGF群では低下しなかった。2) 運動/感覚神経伝導速度評価(MCV/SCV)：MCV、SCVともに、bFGF群においてのみ有意な回復を示した。3)組織学的評価：bFGF群では薄い髄鞘を持つ再生神経線維が多く、クリップ群では変性神経線維が多くみられた。von Frey Testではクリップ群、PBS群においては非侵害刺激による閾値は低下したが、bFGF治療群では低下は認めなかった。このことよりbFGFは末梢神経が神経障害性疼痛を引き起こさず、神経線維再生をもたらした可能性がある。電気生理学的および病理学的検査では治療群がコントロール他群に比し早期からの神経線維再生が確認され、bFGFが神経再生を促進させる可能性が示唆された。
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| Strategy for Future Research Activity |
上記の3群（クリップ群、PBS群、bFGF群）に対して、軟X線画像による血管分布状況評価 やマイクロCT画像による血流量の相対的評価、組織学的評価、免疫組織学的評価（HIF-αな どによる虚血の評価、血管新生とその機序など）、分子生物学的評価（VEGFなどのRNAや タンパク発現量の変化など）を行い、治療モデルにおける神経再生促進機序を解析すべく準備を進めている。
分水嶺高位への神経内bFGF注入モデルの治療効果は確認できつつあるが、臨床応用を念頭においた場合、薬物の神経内注入よりも神経外注入の方がハードルは低い。そこで神経内 注入モデルと同様の神経外注入モデル(bFGFを神経内に注入する代わりに、神経外の周囲 組織に注入する)を作製し、神経外注入法の有用性を検証する予定である。現在、予備実験は順調に進んでいる。
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| Causes of Carryover |
年度内に発注致しましたが、物品ならびに領収書の到着が次年度になってしまったため。既に使い切っております。
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Research Products
(4 results)
