2019 Fiscal Year Research-status Report
Role of Aggrecan in the postnatal development of bone and cartilage.
| Project/Area Number |
19K09649
|
|---|
| Research Institution | Okayama University |
|---|
Principal Investigator |
大橋 俊孝 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 教授 (50194262)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大野 充昭 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 准教授 (60613156)
西田 圭一郎 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 准教授 (80284058)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
|
| Keywords | アグリカン / 軟骨 / 生後発達 / 遺伝子改変マウス |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
生後発達および生体恒常性維持におけるAcanの役割を明らかにするため，Acanfl/flマウスを作製し，タモキシフェン(TAM)誘導性時期特異的Acan全身ノックアウトマウスを樹立した．アグリカンの欠損がECMネットワークの乱れがECMの硬さとTGFβスーパーファミリーの発現に影響し軟骨細胞の増殖分化に影響するという仮説を立て，これを同モデルで検証することを行っている．これまでの主な成果として，透過電子顕微鏡観察から上記ノックアウトマウス脛骨成長板の軟骨細胞の形態異常・カラム配列の乱れ・肥大軟骨層のアポトーシス亢進を認め，アグリカンが生後の骨成長に重要であることを明らかにした．この結果については，昨年の結合組織勉強会で発表した．次に，マウス肋軟骨より軟骨細胞を単離し，4-ヒドロキシタモキシフェン含有培地にて培養することでアグリカンを消失させたin vitroの実験系を用いて，成長因子によるsignal pathwayを検証中である．レーザーマイクロダイセクションとRNA-seqを組み合わせた網羅的パスウェイ解析については、回収できるRNAの質・量面での改良を重ねている．ECMネットワークの不整と硬さの変化が成長板軟骨の増殖分化に影響を与える仮説について，原子間力顕微鏡によるECMの硬さの解析を共同研究者Aszodi博士と計画しているが，新型コロナウイルスの大流行により両研究機関とも研究の制限がかけられ，共同研究打ち合わせが滞っている．
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
おおむね順調に進展しているが、新型コロナウイルスの影響により、共同研究打ち合わせ等が滞り今後への影響が懸念される。
|
| Strategy for Future Research Activity |
レーザーマイクロダイセクションとRNA-seqを組み合わせた網羅的パスウェイ解析についての回収サンプル質・量の改良などによりアグリカンの生後骨成長におけるメカニズムの解明を進めたい．
|
| Causes of Carryover |
概ね研究の遂行は順調であるが、一部の実験計画に遅れがでたことから残額が生じたが、次年度、当該実験の実施にあたり関連する試薬等の購入を行う予定である。
|
