ARシグナルの遮断によって活性化する前立腺癌増悪因子の探索と転移指向性の解明

2019 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K09707
• Research Institution: Kanazawa University
• Principal Investigator: 野原 隆弘 金沢大学, 附属病院, 助教 (20733372)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 溝上 敦 金沢大学, 医学系, 教授 (50248580) ; 泉 浩二 金沢大学, 附属病院, 講師 (80646787)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 前立腺癌 / 去勢抵抗性 / 内臓転移

Outline of Annual Research Achievements

進行前立腺癌に対してはアンドロゲン除去療法が行なわれるが、数年後には去勢抵抗性前立腺癌となる。多くの去勢抵抗性前立腺癌に対する治療が使用できるようになった現在、これまでほとんど見られなかった肺・肝および副腎転移がしばしば見られるようになった。本研究では、アンドロゲン受容体シグナルの活性化で抑制され、かつ前立腺癌細胞を活性化する分子を同定し、その制御機構と特異的な転移指向性（肝や肺）を引き起こす機序を解明する。まず、前立腺癌のアンドロゲン受容体シグナルによって抑制されるシグナルを検出すべく、アンドロゲン依存性ヒト前立腺癌細胞株LNCaPを用いてコントロールLNCaP(NC-LNCaP)とアンドロゲン受容体ノックダウンsiAR-LNCaPの micro RNA変化を比較した。アンドロゲン受容体シグナルによって抑制されている、つまりsiARによって発現が上昇したmicro RNAは以下であった; miR-101, miR-19b, miR-3666, miR-96。また当研究室では以前より前立腺癌細胞のサイトカイン自己分泌作用を明らかにしているので、サイトカインを対象としたPCRアレイを行ったところsiARによってCCL2とCCL20の発現上昇が認められた。すでに以前の研究でCCL2の前立腺癌細胞に対する作用は明らかにされており、本研究ではまずCCL20に着目した。去勢マウスで増殖が認められるアンドロゲン依存性ヒト前立腺癌細胞株C4-2BもsiARを作成し、ウェスタンブロットでCCL20の発現を確かめたところ、確かにsiAR-C42BおよびsiAR-LNCaPともにCCL20の発現が亢進していた。また、その受容体CCR6はいずれの細胞株にも恒常的に発現していた。今後、CCL20の役割を解析するとともに、micro RNAの機能についても解析を進める予定である。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

3年間の予定を100%とした場合、50%程度と考えられる。アンドロゲン受容体シグナルによって抑制されているmicro RNAと自己分泌作用を及ぼす分泌蛋白を一定程度同定しており、予定されていた実験の中では、大方の実験は順調に進んでいると考えられる。

Strategy for Future Research Activity

今後、CCL20の前立腺癌転移に関する役割を解析するとともに、候補となった各micro RNAの機能についても解析を進める予定である。

Causes of Carryover

予定していた抗体を購入していないため残額が生じている。これらをより深いメカニズムの探索のため、サイトカインアレイを追加して行う費用に充てる予定である。