凝固系をターゲットとした卵巣癌腹膜播種機序の解明と治療戦略に関する基礎的研究

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K09797
• Research Institution: Kanazawa University
• Principal Investigator: 水本 泰成 金沢大学, 附属病院, 講師 (00420331)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 藤原 浩 金沢大学, 医学系, 教授 (30252456) ; 大黒 多希子 金沢大学, 学際科学実験センター, 教授 (30767249) ; 松岡 歩 金沢大学, 附属病院, 特任助教 (50579662)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 卵巣癌 / 腹膜播種 / がん細胞集塊 / フィブリン網誘導

Outline of Annual Research Achievements

卵巣癌は早期より腹膜播種をきたす悪性腫瘍の一つであり、腹膜間質へ侵入する分子機構として、「腹膜上皮への接着とそれに引き続く上皮間葉転換が重要」とされている。今回これらの機序とは異なり、癌細胞集塊が自身の構造とそれが対峙する腹膜上皮の構造を保ったまま周囲にfibrin網が誘導され、それを足場に血管新生を伴う宿主の間質組織が形成されている像を観察した。そこで「癌細胞集塊は腹膜中皮に対峙した後、宿主の間質細胞に作用し、癌細胞集塊の周囲に腹膜組織と連続した間質組織を形成誘導することで癌細胞集塊の構造を保ったまま腹膜間質への浸潤を完遂する」という作業仮説をあげて、これを検証する目的で本研究を計画した。具体的には①臨床検体を用いた仮説を支持する分子の発現解析、②卵巣癌細胞株を用いた仮説を支持する分子の発現誘導因子のin vitro解析、および③マウス卵巣癌腹膜播種モデルを用いた仮説のin vivo解析を遂行して卵巣癌の新しい腹腔内播種性転移の分子機構を解明し、新規の治療法開発につながる知見を得ることを目指す。本研究の作業仮説が立証された場合には新しい学説を提示すると同時に、fibrin網形成阻害など凝固系機序を標的とした新たな治療法を提言できる可能性を秘めている。これまでに臨床検体において、癌細胞の周囲に存在する癌間質細胞にVEGF-A発現が確認されており、また、赤血球を内包する微小血管の存在も確認されていることより、正常中皮細胞層を維持しながら、新生血管を誘導する現象が確認されている。また、癌細胞集塊がフィブリン網に捕らえられた早い段階ではE-cadherin発現を伴う上皮様性格を持っているが、新生血管誘導路を介して、浸潤過程においてはN-cadherin発現が優位となり、間葉系性格の獲得を示唆する所見を確認した、これらの解析を中心に今後の臨床検体を用いた研究は進める予定である。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

COVID-19感染拡大に伴い、研究環境に時間的、空間的、人員的の制限があるため、実験が遅延している。

Strategy for Future Research Activity

原発巣から遊離した卵巣癌細胞集塊が、フィブリン網に捕らえられる現象における、腹膜中皮細胞の機能解析を中心に研究を進める。卵巣癌細胞株および中皮細胞株を用いたin vitroにおける実験系を確立し、その相互作用、特にフィブリンーフィブリノーゲンカスケードにおける責任因子の同定を行う。また、実験動物（マウス）における実験系を確立し、腹膜播種形成における凝固系をターゲットとした治療方法に関して、検討する。
また、腹膜播種に際して生じる、血管内分子の変化を観測し、腹膜播種を検知するバイオマーカー開発を行う。特に凝固系分子の変化が観察されるのであれば、卵巣癌随伴症候群であるトルソー症候群のハイリスク群を拾い上げる可能性について検討する。

Causes of Carryover

COVID-19感染拡大に伴い、本年の研究をin vitro実験系中心に実施したため、予定されていた使用予定額に到達しなかった。次年度は持ち越した額を含めて動物実験を行う予定である。