新規ワクチン開発と誤嚥性肺炎予防に繋げる肺炎球菌ノイラミニダーゼAの役割解明

2022 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K09878
• Research Institution: Wakayama Medical University
• Principal Investigator: 金子 富美恵 和歌山県立医科大学, 医学部, 助教 (40328414)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 河野 正充 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (20511570) ; 須納瀬 弘 東京女子医科大学, 医学部, 教授 (50261631) ; 保富 宗城 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (90336892)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: 肺炎球菌 / ノイラミニダーゼ / 鼻腔保菌 / 誤嚥性肺炎 / 肺炎球菌ワクチン

Outline of Annual Research Achievements

嚥下機能低下に伴う誤嚥性肺炎に対する予防と再発・重症化回避のためには、重要な起因菌である肺炎球菌につき現在実用化されている莢膜多糖体ワクチン（PPV）・蛋白結合型ワクチン（PCV）の弱点を補う次世代の肺炎球菌ワクチンの開発が急がれている。我々は肺炎球菌に共通する酵素蛋白でシアル酸の切断にて粘膜 への菌定着をノイラミニダーゼA(neuraminidase A: NanA)に着目、高齢者かつ慢性閉塞性肺疾患（COPD）を有する患者の誤嚥性肺炎の発症・重症化への関与とNanA 阻害型ワクチンの予防効果を明らかにすることを目指す。
令和4年度の成果を報告する。肺炎球菌感染実験には、血清型4型、6A型（TIGR4WT, 6AWT）と、それぞれの株より作成したNanA欠損株 (TIGR4ΔNanA, 6AΔNanA)を 用いた。
1)NanAは、LPXTG motifによる膜アンカー構造を持つが、肺炎球菌血清型によりバリエーションがあることが知られている。血清型4型であるTIGR4株 は、全ゲノムが公開されており、LPXTG motifを持たない分泌型NanAを持つ。我々が使用している6A型肺炎球菌をNGSにてゲノム解析を行ったところ、LPETG motifを持つ膜アンカー型NanAを持つことが確認された。
2)TIGR4WTの培養上清とTIGR4ΔNanAの混合菌液を、6週齢メスCBA/Nマウスに覚醒下に経鼻的接種を行い、鼻腔洗浄液
嗅上皮を含む鼻腔組織鼻腔での保菌と感染動態を評価した。上清に遊離した分泌型NanAによってはNanA欠損株のコロニー形成能は補完されなかった。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

COVID-19感染症対策のため、研究に対するエフォートを減少させざるを得なかった。誤嚥性肺炎モデルにおける投与菌量、投与経路、評価時期につき再検討を行ったが、年度中に結論に至らなかった。

Strategy for Future Research Activity

NanA recombinantの作成にてNanA欠損株のコロニー形成能の補完実験を予定した。延長依頼を提出、令和5年度に引き続き研究を行う予定である。

Causes of Carryover

COVID-19感染症の拡大に伴い、研究におけるエフォートが低下せざるを得なかった。また、追加実験を行うこととなり、次年度のマウス購入、物品購入に使用となった。