リンパ浮腫におけるBiotubeを用いた新規治療法の開発

2021 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K10031
• Research Institution: Yokohama City University
• Principal Investigator: 北山 晋也 横浜市立大学, 附属病院, 助教 (30714258)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 鍵本 慎太郎 横浜市立大学, センター病院, 助教 (10737480) ; 矢吹 雄一郎 横浜市立大学, 附属病院, 助教 (30610357) ; 前川 二郎 横浜市立大学, 医学研究科, 教授 (70244449) ; 三上 太郎 横浜市立大学, 医学研究科, 客員准教授 (90315804)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: lymphedema / biotube / microsurgery / regenerative medicine

Outline of Annual Research Achievements

2019年度までの研究により、biotubeの作成と大腿静脈への吻合・開存性に関して以下の結果を得ている。
（１）収縮により樹脂の外径よりやや小さい内径となるものの、概ね外径に対応した内径のbiotubeが形成された。600μm程度の小口径の樹脂を用いた場合にbiotube周囲の炎症細胞浸潤と壁の肥厚が見られる例があり、至適口径や限界口径などが存在する可能性が示唆された。（２）開存率は50％（14部位中7部位）で、口径別では大腿動脈と口径差の少ない樹脂Bで最も高く（57％）、最もの内径の小さい樹脂Cで最も低い（33%）結果であった。動脈にbiotubeを吻合した過去の報告よりも開存率は低く、flowの強さや樹脂の口径／表面性状などの影響を受けている可能性が示唆された。
上記を受けて2020年度は移植後1か月のbiotubeを回収し、組織学的な解析を行った。HE・EVG・αSMA・CD34の各染色を行い、正常血管（動脈・静脈）を比較対象として以下の所見を得た。（３）正常血管では中膜にEVGやαSMAで染色される組織を認めたが、biotubeでは吻合前・後に関わらずそれらを認めず、中膜用組織の再構築は認めなかった。（４）開存を認めたbiotubeの内腔には正常血管よりも薄いもののCD34陽性細胞の層を認め、tube内の内膜化が起こっていることが示唆された。
これらを受け、2021年度はヒト／ラットリンパ管内皮細胞の特性解析等を行う計画としたが、内皮細胞の培養に際して安定した培養条件や操作の模索に時間を要している。COVID-19による影響も引き続いており、研究の進捗に制限を受けている状況である。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

リンパ管内皮細胞の特性解析において、内皮細胞の安定的な培養操作に時間を要している。また、昨年同様COVID-19の影響も引き続きあった。とはいえ、biotubeの作成と吻合部の評価、組織学的解析など研究の主要な評価項目に関しては上記の通り順調な進捗であり、内皮細胞培養に時間を要することに関しては研究計画に記載した通り想定の範囲内である。

Strategy for Future Research Activity

ヒト／ラットリンパ管内皮細胞の特性解析など残存課題に関して引き続きアプローチを行う。

Causes of Carryover

昨年に引き続き多くの学会がオンライン開催となり、旅費等の支出が抑えれらた。また、実験の進捗がやや遅れていることにより研究費用も抑えれらた。これらの要因により次年度使用額が発生した。次年度は残存課題に対する研究、およびCOVID-19の状況次第ではあるが国際学会を含む各種学会への参加、情報収集などへの使用を検討している