リンパ浮腫におけるBiotubeを用いた新規治療法の開発

2022 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K10031
• Research Institution: Yokohama City University
• Principal Investigator: 北山 晋也 横浜市立大学, 附属病院, 助教 (30714258)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 鍵本 慎太郎 横浜市立大学, 市民総合医療センター, 助教 (10737480) ; 矢吹 雄一郎 横浜市立大学, 医学研究科, 客員講師 (30610357) ; 前川 二郎 横浜市立大学, 医学研究科, 客員教授 (70244449) ; 三上 太郎 横浜市立大学, 医学研究科, 客員准教授 (90315804)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: lymphedema / biotube / microsurgery / regenerative medicine

Outline of Annual Research Achievements

2021年度までまでの研究により、biotubeの作成と大腿静脈への吻合・開存性に関して以下の結果を得ている。
（１）収縮により樹脂の外径よりやや小さい内径となるものの、概ね外径に対応した内径のbiotubeが形成された。600μm程度の小口径の樹脂を用いた場合にbiotube周囲の炎症細胞浸潤と壁の肥厚が見られる例があり、至適口径や限界口径などが存在する可能性が示唆された。（２）開存率は50％（14部位中7部位）で、口径別では大腿動脈と口径差の少ない樹脂Bで最も高く（57％）、最も内径の小さい樹脂Cで最も低い（33%）結果であった。動脈にbiotubeを吻合した過去の報告よりも開存率は低く、flowの強さや樹脂の口径／表面性状などの影響を受けている可能性が示唆された。上記を受けて2020年度は移植後1か月のbiotubeを回収し、組織学的な解析を行った。HE・EVG・αSMA・CD34の各染色を行い、正常血管（動脈・静脈）を比較対象として以下の所見を得た。（３）正常血管では中膜にEVGやαSMAで染色される組織を認めたが、biotubeでは吻合前・後に関わらずそれらを認めず、中膜用組織の再構築は認めなかった。（４）開存を認めたbiotubeの内腔には正常血管よりも薄いもののCD34陽性細胞の層を認め、tube内の内膜化が起こっていることが示唆された。
これらを受け、2021年度からはヒト／ラットリンパ管内皮細胞の特性解析等を行う計画とした。2021.22年と内皮細胞の培養に際して安定した培養条件や操作の模索を行ってきたが、COVID-19による影響を強く受けたこともあり、上記作業に時間を要している状況である。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

リンパ管内皮細胞の安定的な培養条件と操作をいろいろと模索しているが、いまだ最適な条件が不明であり時間を要している。COVID-19の影響もだいぶ縮小したとはいえ昨年度末あたりまではやはりあり、全体の進捗に影響を与えている。

Strategy for Future Research Activity

残存課題に対して引き続きアプローチを行う。内皮細胞の培養条件検索には今後も時間を要しそうな見込みのため、これまでの実験結果を活かしてより小口径のbiotubeを作成してラットリンパ管へ吻合し開存率や組織所見などの評価を行うなど、実験計画の方向性変更も含めて方策を検討中である。

Causes of Carryover

昨年に引き続き多くの学会がオンラインあるいはハイブリッド開催となり、旅費等の支出が抑えられた。残された予算は限られるが、2023年度には残存課題に対する実験等に予算を使用する計画である。