2022 Fiscal Year Research-status Report

Regeneration of the nail -development of the new treatment for nail deficiency using nail stem cell-

Research Project

Project/Area Number	19K10032
Research Institution	Nagoya City University
Principal Investigator	岡本秀貴名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 准教授 (00453069)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	川口洋平名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 助教 (90766734) 永谷祐子名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 教授 (90291583) 浅井清文名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 教授 (70212462)
Project Period (FY)	2019-04-01 – 2024-03-31
Keywords	ハードケラチン / 抗ハードケラチン抗体 / 爪母上皮細胞 / 爪母間様細胞 / コラーゲンゲル / 爪 / 再生
Outline of Annual Research Achievements	ウィスターラットの前肢、後肢から爪母を採取して、爪母細胞のケラチノサイトの培養を試みていたがコンタミネーションすることが多く、組織採取の方法を模索してきた。爪母を採取する前に、前肢、後肢をアルコール消毒して、クリーンベンチ内で爪母を採取するようにしてからはコンタミネーションはなくなった。爪母細胞のケラチノサイトをコラーゲンゲル内で培養したものとポリカプロラクトン上で培養したものを作製して、同種のウィスターラットの背部皮下に移植した。移植後2週間で移植物を摘出したところ、ハードケラチンの産生は認められず、貪食細胞によって貪食されたものと思われた。また、ポリカプロラクトン上ではケラチノサイトはうまく生着しなかったものと思われた。そこで、爪母細胞のケラチノサイトをコラーゲンゲル内とマトリジェル内で培養したものを作製して、同種のウィスターラットの背部皮下に移植した。移植後2週間で移植物を摘出して現在標本作成中である。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 3: Progress in research has been slightly delayed. Reason 当初は動物実験施設内で爪母の採取を行って、その後にクリーンベンチ内で培養を開始していたが、コンタミネーションが多く発生した。清潔レベルが低い動物実験施設での組織採取をやめて、前肢後肢をアルコール消毒したものをクリーンベンチ内で処理して爪母を採取するようにしたところコンタミネーションすることはなくなった。この過程でどこが原因なのか試行錯誤を重ねてトライアンドエラーを繰り返してきたため。
Strategy for Future Research Activity	前述したように、コラーゲンゲル内で培養した爪母ケラチノサイトをウィスターラットの背部皮下に移植して、再現性をもって生体内でハードケラチンの産生が得られるようになれば、次はヒトの爪甲の様に平らな爪構造のようなハードケラチンが産生されるようなスキャフォードの作成に移る予定である。
Causes of Carryover	前述したように、爪母細胞のケラチノサイトを培養する過程でコンタミネーションが生じたため、その原因究明と改善のために時間を費やしたため、次年度への延長とさせていただきました。次年度はコンタミネーションすることなく細胞培養を行って、生体内でのハードケラチン産生と新たなスキャフォードの開発を行う予定である。