2021 Fiscal Year Annual Research Report

染色体工学技術を利用したゲノムライティングによる口腔がんの発生機構の解明

Research Project

Project/Area Number	19K10086
Research Institution	Tottori University
Principal Investigator	久郷裕之鳥取大学, 医学部, 教授 (40225131)
Project Period (FY)	2019-04-01 – 2022-03-31
Keywords	口腔扁平上皮がん / hTERT / 人工染色体
Outline of Annual Research Achievements	本研究は、ヒト扁平上皮がんにおけるヒト3番染色体上の3p21.3領域に存在が示唆されるテロメレース(TERT)抑制遺伝子(群)の同定と機能解析を目的としている。本年度は、これまでの研究成果から得られた3p21.1上にコードされるhTERT抑制効果をもつ候補遺伝子Aと候補遺伝子Bの遺伝子全長を保持するBACベクターの人工染色体へ搭載を行った。その結果、候補遺伝子Aについては人工染色体上への搭載が確認された。一方、候補遺伝子Bについては、宿主染色体への挿入が確認されたため追試を行ている。また、cDNAレベルでの遺伝子AとBの過剰発現実験の追試を行った結果、再現性をもってhTERTの抑制効果が確認された。加えて、hTERT抑制に伴って細胞老化が誘導されるかどうかをSA-β-ガラクトシダーゼ染色によって確認を行ったところ、hTERT発現抑制効果が特に高いクローンにおいて細胞老化の誘導が確認できた。この結果は、遺伝子Aと遺伝子BによるhTERT抑制効果が、テロメアの伸長・維持を行うテロメレース活性の低下にまで影響し、細胞が複製老化を起こしたことを示している。また、Human protein Atlasデータベースを用いて、候補遺伝子Aと候補遺伝子Bの腫瘍マーカーとして可能性を検討した。その結果、免疫組織化学染色の解析結果では、がん組織において遺伝子Aではほとんど陰性を示した。一方、遺伝子Bについても発現が低いか陰性であった。以上の結果から、口腔扁平上皮がんにおいて遺伝子Aと遺伝子BがhTERT抑制遺伝子として機能し、その発現低下ががんの発生と進展に寄与している可能性が示唆された。