2021 Fiscal Year Annual Research Report
再生治療が組織にもたらす代謝アダプテーションと３次元的超微細構造変化の解析
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19K10166
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
野崎 剛徳 大阪大学, 歯学部附属病院, 准教授 (30263304)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
石濱 泰 京都大学, 薬学研究科, 教授 (30439244)
豊田 岐聡 大阪大学, 理学研究科, 教授 (80283828)
三浦 治郎 大阪大学, 歯学部附属病院, 助教 (70437383)
清水 真人 大阪大学, 歯学部附属病院, 医員 (70380277)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | 歯周組織再生 / FGF-2 / オミクス解析 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ビーグル犬にプロポフォールとイソフルランによる麻酔を施して下顎両側の第四前臼歯を抜去した後、約４週間の治癒期間をおいて両側の第一後臼歯近心部ならびに第三前臼歯遠心部に２壁性の人工的骨欠損を作成した。その一側にリグロス（0.3％FGF-2）を適用して試験側とし、残る一側に基材（HPC）を適用して対象側とした。術後はグルコン酸クロルヘキシジンを用いて口腔内清掃を行いながら治癒状態を観察するとともに、経時的に歯肉溝浸出液（GCF）の採取を行った。そして術後４週で深麻酔下に放血による安楽死を行って組織を採取し、マイクロCTを用いた骨再生量の計測を行うとともに、免疫組織学的解析を行なった。また、採取したGCFにメタノール/水/クロロホルム混合溶液を加えて検体を超音波抽出し、遠心濃縮と凍結乾燥を行なった後にメトキシアミン塩酸塩とN-メチル-N-トリメチルシリルトリフルオロアセトアミドを順次添加して誘導体化し、CP-Sil 8 CB for Aminesカラムを用いたガスクロマトグラフィー／質量分析（GC/MS）によるオミクス解析を行った。
マイクロCT解析の結果、試験側では対照側と比較して良好な歯周組織再生が得られていた。また、免疫組織学的解析により、両側ともに血管新生や組織再生に関与する因子の発現が認められたが、試験側ではオステオポンチンの発現が上昇していることが示唆された。一方、オミクス解析により、試験側と対照側で各時点のTICクロマトグラムのピークパターンに違いがみられたことから、組織再生に関与する因子は両側ともに発現するが、その時期に違いがある可能性が示唆された。これらの結果から、歯周組織の再生治療にFGF-2を用いることにより、組織の治癒に関与する細胞の代謝や細胞間相互作用に変化が生じ、組織再生に必要な因子がより効果的に発現することで、良好な組織再生が得られることが示唆された。
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