2019 Fiscal Year Research-status Report
顎骨骨髄間質細胞を用いた顎骨再医療のための骨形成能診断法の開発
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19K10212
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| Research Institution | Kagoshima University |
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Principal Investigator |
末廣 史雄 鹿児島大学, 医歯学域鹿児島大学病院, 講師 (40524781)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
西村 正宏 鹿児島大学, 医歯学域歯学系, 教授 (00294570)
石井 正和 鹿児島大学, 医歯学域歯学系, 助教 (00456683)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | MSC / BMSC / 顎骨骨髄由来間質細胞 / 骨再生 / 骨形成マーカ / サイトカイン |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究期間以前から我々の研究グループでは継続的に顎骨骨髄由来間質細胞（Maxillary/Mandibular bone marrow stromal cell：MBMSC：MBMSC）の採取を行っているが、本研究期間中に新たに6名のドナーから採取したMBMSCの増殖を確認した。増殖したMBMSCは細胞増殖能、細胞表面抗原解析、ALP活性定量およびアリザリンレッド染色による骨分化能の確認を実施している。
並行して本研究期間以前に採取し、既にin vitroでの細胞の質を確認したMBMSCを用いて骨形成マーカーの探索にも着手している。具体的には、既にin vivoでの骨形成能を確認したMBMSCが培養上清中に分泌するサイトカインを抗体アレイを用いて網羅的に探索し、骨形成の指標となり得るサイトカインを選定した。候補には骨形成能が高い細胞が分泌量が多いものだけでなく、骨形成能が低い細胞からの分泌量が多い、いわゆるネガティブマーカーとしての利用が考えられるサイトカインも含まれた。抗体アレイに用いていないMBMSCについても、選定したサイトカインの分泌量をELISA法を用いて定量し、in vitroでの骨分化能との相関を検討したが、選定したマーカーとin vitroでの骨分化には相関がみられなかった。しかしながら、我々は以前の研究からin vitroでの骨分化能とin vivoでの骨形成能は必ずしも一致しないとの結果を得ており、本研究の目的はin vivoでの骨形成能の指標となるマーカーの探索であることから、MBMSCのSCIDマウスへの移植実験を行い、骨形成能の確認をすすめているところである。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本研究計画のR2年度の目標である高骨形成細胞マーカーの選定まで実施できており、本研究はおおむね順調に進展している、あるいは当初の計画以上に進展しているといえる。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後は選定したマーカーが実際にMBMSCの骨形成能判定に用いることが出来るだけの精度がえられるか、細胞株の数を増やして検討を進めていく必要がある。
さらに選定したサイトカインをマーカーとして利用するだけでなく、その物質のMBMSCの骨分化への影響を含めた機能解析を行うこと、選定したサイトカインを移植時に添加する、あるいは移植前に培地に添加する等の方法で骨形成能の促進が出来ないか、検討を行っていく予定である。
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| Causes of Carryover |
物品の大量購入によるディスカウントやキャンペーンを利用することで計画よりも研究費使用額が抑えられている。繰越金は次年度以降の培地や抗体といった消耗品購入費用、あるいは旅費にあてる。
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