2023 Fiscal Year Annual Research Report
DNA修復経路と細胞内物質輸送を標的とした口腔がん治療法の開発
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19K10272
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| Research Institution | Nara Medical University |
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Principal Investigator |
桐田 忠昭 奈良県立医科大学, 医学部, 教授 (70201465)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
仲川 洋介 奈良県立医科大学, 医学部, 助教 (00714875)
森 英一朗 奈良県立医科大学, 医学部, 准教授 (70803659)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | DNA修復 / ATR阻害 / 5-FU |
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| Outline of Annual Research Achievements |
DNA修復機構のPIKKファミリーを構成するATRを阻害することで、5-FUの殺細胞効果が上昇するメカニズムの解明を進めてきた。
ウエスタンブロッティングでは5-FUの濃度依存性にATRの自己リン酸化が強く進み、ATR阻害剤を加えることによりそれらのATRのリン酸化は抑制されることを確認した。また、γH2AX抗体を用いて免疫染色を行うことで、ATR阻害により5-FUによるDNA二本鎖切断が増加することを確認した。また、フローサイトメトリーにより5-FU処理後に細胞周期がS期で停止し、5-FUとATR阻害剤の併用でSub-G1の割合が増加していることが明らかとなった。
5-FU処理後の遺伝子発現変動をRNA sequenceにて定性的に、qPCRにて定量的に行った。その結果、有意な発現変動を認めた9種の遺伝子はCCNE1、CCNE2、CDKN1A、TXNIP、CCNB1、CDKN3、AURKA、CDC20、PSRC１であり、S期以降で細胞周期停止に働く傾向の遺伝子の発現であった。AURKAの発現抑制は、ATRはAurora Aの活性を受けてセントロメア領域にリクルートされて染色体分配時の安定性に寄与しているることから、ATR阻害剤と5-FU増感効果のメカニズムとして染色体分配時への影響、染色体の崩壊などが考えられた。
最終年度には、5-FUとATR阻害剤併用時の遺伝子発現を網羅的に解析するためプロテオミクス解析を行い、オートファジーに関連する遺伝子の著明な発現上昇を認める結果を得た。
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[Presentation] 当科における口腔癌cN1症例の臨床的検討2023
Author(s)
大鶴光信,山川延宏,桐田忠昭,山田慎一,栗田 浩,釘本琢磨,原田浩之,長谷川巧実,明石昌也, 竹本影範,鵜澤成一,梅田正博
Organizer
第47回日本頭頸部癌学会総会・学術講演会
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[Presentation] A next-generation sequencing study on genetic changes in oral cancer development2023
Author(s)
Yagyuu T,Fujii T,Funayama N,Zaizen M,Kurihara-Shimomura M,Nakamura H,Ueda N, Yamakawa N,Sasahira T,Kirita T.
Organizer
The 3rd International Congress of the Asian Oncology Society (AOS), in conjunction with the 61st Annual Meeting of the Japan Society of Clinical Oncology
Int'l Joint Research
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[Presentation] A new T classification for lower gingival squamous cell carcinoma2023
Author(s)
Yamakawa N,Okura M,Hasegawa T,Otsuru M,Sakai H,Hirai E,Rin S,Yamada SI, Yanamoto S,Yokota Y,Umeda M,Kurita H,Ueda M,Akashi M,Kirita T
Organizer
9th World Congress of the International Academy of Oral Oncology (IAOO)
Int'l Joint Research
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[Book] 口腔癌2023
Author(s)
桐田 忠昭、原田 浩之
Total Pages
724
Publisher
医歯薬出版
ISBN
978-4-263-42315-8
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