2019 Fiscal Year Research-status Report

新規がん治療法開発に向けた口腔がん幹細胞における上皮間葉転換抑制因子の機能解明

Research Project

Project/Area Number	19K10274
Research Institution	Tokyo Medical University
Principal Investigator	渡辺正人東京医科大学, 医学部, 臨床講師 (40349460)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	河野通秀東京医科大学, 医学部, 助教 (00421066) 古賀陽子東京医科大学, 医学部, 准教授 (10392408) 近津大地東京医科大学, 医学部, 主任教授 (30343122)
Project Period (FY)	2019-04-01 – 2022-03-31
Keywords	口腔がん幹細胞 / 上皮間葉転換 / Fbxw7 / microRNA
Outline of Annual Research Achievements	昨年度、下記２つの項目について研究を進めて来た。 1.腫瘍組織内からがん幹細胞を単離および上皮間葉転換マーカー発現の検討。切除された口腔扁平上皮癌の実質組織より抽出された細胞をコラゲナーゼ処理し培養しているが、安定した継代培養には至っておらず、十分な量のALDH+/CD44+陽性細胞を確保出来ていない状況である。対象となるがん組織の状態にも影響される為、今後も症例を吟味し検討を続ける予定である。また、上皮間葉転換マーカーの発現では免疫染色法を用いて６種類のマーカーの発現様式を検討する為、順次施行している状況である。 2.上皮間葉転換型細胞に対し薬剤感受性の検討。上皮間葉転換型細胞の抗癌剤抵抗性を評価する項目であるが、96 wellプレート上に細胞数を一定に調整し抗癌剤を加えインキュベートした。その後、細胞数を測定しその抵抗性を試みた。現在、単離される細胞が不十分な為、まだ安定した薬剤感受性試験結果まで至っていない。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 4: Progress in research has been delayed. Reason 腫瘍組織内からのがん幹細胞の単離において、計画通りに再現性のある培養が困難であった為、現状においても薬剤感受性の検討まで至っていない。また、検体の口腔扁平上皮がん幹細胞に対して一部の上皮間葉転換マーカーの発現にむらがあり、抗体の希釈倍率や前処理の調整中である。
Strategy for Future Research Activity	昨年度同様、腫瘍切除組織に個体差がある為引き続き症例数を増やし安定した継代培養ができる様継続していく。腫瘍組織の検体により上皮間葉転換マーカーが特定されているものは、レーザーマイクロダイセクションにて分子レベルで解析を進めていく予定である。
Causes of Carryover	当該年度に想定外の試薬使用量がかさみ、論文の採択もされたため研費が不足した。そのため、未使用額は令和２年度配分額とあわせて論文掲載料の支払いに充てる。