2020 Fiscal Year Research-status Report
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19K10317
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| Research Institution | Nagasaki University |
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Principal Investigator |
片山 郁夫 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(歯学系), 助教 (80295089)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
佛坂 由可 長崎大学, 病院(歯学系), 講師 (10244089)
佐々木 美穂 長崎大学, 病院(歯学系), 助教 (10437874)
田代 茂樹 長崎大学, 病院(医学系), 助教 (20300882)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | 細胞質型ホスホリパーゼA2 / 電離放射線 / 細胞生存シグナル / 細胞死シグナル |
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| Outline of Annual Research Achievements |
令和元年度は、細胞に放射線を照射した際の「細胞死シグナル」について、cPLA2がどのように関与するのか検討を行った。この実験にはcPLA2WTマウスおよびcPLA2KOマウスの肺から分離したcPLA2(+/+)およびcPLA2(-/-)の線維芽細胞を使用した。その結果、cPLA2は「細胞死シグナル」に対して促進的に関与していることが示唆された。
令和２年度は、細胞に放射線を照射した際のcPLA2の「細胞生存シグナル」への関与を検討した。令和元年度と同様に、cPLA2KOマウスの肺から分離したcPLA2(+/+)およびcPLA2(-/-)の線維芽細胞を用い実験を行った。cPLA2(+/+)およびcPLA2(-/-)の細胞に放射線を照射し、「細胞生存シグナル」の起点となるEGFRの活性化を検討した。EGFRの活性化は、自己リン酸化を経時的に観察することで評価した。その結果、cPLA2(+/+)の細胞では放射線照射３０分後と６０分後、８時間後にリン酸化のピークがあるのに対して、cPLA2(-/-)の細胞では照射直後と６０分後、２時間後にリン酸化のピークがあることがわかった。このことから、放射線による「細胞生存シグナル」に対してcPLA2は抑制的に関与していることが示唆された。さらにEGFRの下流の遺伝子の１つであるAktの活性化について、経時的なリン酸化を検討を行ったところ、cPLA2(+/+)の細胞では放射線照射８時間後にリン酸化のピークがあるのに対して、cPLA2(-/-)の細胞では４時間後にリン酸化のピークがあることがことが確認された。このことからも、放射線による「細胞生存シグナル」に対してcPLA2は抑制的に関与していることが示唆された。今後は、Akt 以外のEGFRの下流の遺伝子の活性化について解析していきたい。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
細胞に放射線を照射した際の「細胞生存シグナル」において、cPLA2が関与していることを示すことができたが、EGFRの下流の遺伝子の解析についてはまだ途中でありやや遅れている。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後は「細胞死シグナル」および「細胞生存シグナル」のさらに下流のシグナルについて検討を行い、cPLA2の関与を明らかにして行きたい。
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| Causes of Carryover |
（理由）細胞に放射線を照射した際の「細胞生存シグナル」におけるcPLA2の関与を示すことはできたが、下流の遺伝子までは検討できなかった。また参加を予定していた日本歯科放射線学会第１回秋季学術大会（長野県）および日本歯科放射線学会第４０回関西・九州合同地方会（福岡県）がZoomによるWeb開催となり旅費を使用しなかった。
（使用計画）下流の遺伝子の解析に必要な抗体・試薬の購入、および日本歯科放射線学会第２回秋季学術大会、日本歯科放射線学会第４１回関西・九州合同地方会への旅費に充てる予定。
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