唾液検査に応用する口腔癌バイオマーカーをメタボローム解析と多重蛍光染色で検証する

2022 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K10367
• Research Institution: Tokyo Dental College
• Principal Investigator: 片倉 朗 東京歯科大学, 歯学部, 教授 (10233743)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 菅原 圭亮 東京歯科大学, 歯学部, 准教授 (10506926) ; 別所 央城 東京歯科大学, 歯学部, 非常勤講師 (30433973) [Withdrawn]
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: 扁平上皮癌 / メタボローム解析 / OPMDｓ / liquid biopsy

Outline of Annual Research Achievements

「口腔癌患者の唾液中に特 的に発現する代謝物の再現性の検証」について、術前の口腔癌患者および健常者の全唾液および血液（血液 時の 血）を3mlを採取し、LC-MS解析を行い（フィルジェン(株)に委託）口腔癌患者に特 的に認められるタンパク質および代謝物をOncologyReports,2017DOI:10.3892で報告した。25種の物質と比較 証する。バイオマーカーとして が高いと考えられるタンパク質および代謝物に し、Real-timePCRやWestern Blotting、口腔癌細胞株HSC-３およびHSC-４での染色によりその同定を行う。検証ができた物質のうちTSAにより発色可能な物質をバイオマーカーの候補として選 を予定している。そ
れと並行して「患者の口腔癌（舌癌 歯肉癌）の切除標本からの組織採取と保管」を進め、唾液を採取した患者の手術 体から 死組織を含まない癌組織を約10mm×10mmで採取する。検体は２分割または３分割し、それぞれを中性緩衝ホルマリン溶液固定と-80°Cの凍結標本および遺伝子解析用およびタンパク質抽出用として、約3mm×3mm角組織片ブロックの 集 保存を行っている途中である。2022年度に引き続き、データの蓄積の目的のため現在必要採取検体を確保しており、LC-MC解析および多重光染色を委託している。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

2022年度も引き続きコロナウイルス感染症蔓延により 施設のみでの検体採取が困難な状況であった。また、現在、追加での体採取およびLC-MS解析、多重染色を行っている。

Strategy for Future Research Activity

2023年度は2021年度に採取した 体 のTSA多重染色による癌組織におけるバイオマーカー候補物質の共局在の 察から、「バイオマーカー候補とする代謝物質の組み合わせによる口腔癌識別能力の多重ロジスティック解析」を2022年度に引き続き進めていく。

Causes of Carryover

コロナ禍の影響で進めていた検体採取と免疫染色の施行は目標値を達成できたが、追加での検体数の施行が未達のため残金が生じている。