Development of a rapid detection kit for human parainfluenza virus type 3

2023 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K10593
• Research Institution: Osaka Institute of Public Health
• Principal Investigator: 改田 厚 地方独立行政法人 大阪健康安全基盤研究所, 微生物部, 主幹研究員 (50372131)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2025-03-31
• Keywords: ヒトパラインフルエンザウイルス３型 / マウス / 乳幼児 / 呼吸器感染症 / モノクローナル抗体

Outline of Annual Research Achievements

ヒトパラインフルエンザウイルス3型 (HPIV-3)の抗体作製を進めた。VeroE6/TMPRSS2細胞を用いて、臨床検体からHPIV-3を分離後、大量に調製した。ウイルスを精製後、マウス４匹に免疫した。得られたハイブリドーマの上清について、HPIV-3 を感染させた VeroE6/TMPRSS2細胞をホルマリン固定したものを抗原として、間接免疫蛍光法により産生抗体のスクリーニングをおこなった。間接免疫蛍光法で高い反応性を示したハイブリドーマについて、IgG 産生が確認された50クローンについて、その後の解析対象とした。in vitro において、中和試験をおこない、各クローンの中和活性を検討した。その結果、約７割のクローンが中和活性を示した。複数の臨床検体からHPIV-3株を分離した。それらを用いて、各クローン産生抗体の反応性の評価・検証を進めている。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

長期間にわたる新型コロナ検査対応のため、計画が当初予定よりも遅れている。

Strategy for Future Research Activity

抗体の性能評価に使用する HPIV-3 ウイルス株を複数分離済である。間接免疫蛍光法、immunoblot法により効率的に各クローンの産生抗体を評価する準備を整えた。

Causes of Carryover

研究期間延長のため。研究成果報告のために使用予定。