毒結合タンパク質複合体の解析によるトラフグ毒輸送機構の解明

2023 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 19K15915
• Research Institution: Fisheries Research and Education Agency
• Principal Investigator: 辰野 竜平 国立研究開発法人水産研究・教育機構, 水産大学校, 講師 (70771872)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: トラフグ / PSTBP / TTX

Outline of Annual Research Achievements

2023年度はこれまでに得られたトラフグの血漿を試料として、フグ毒結合タンパク質PSTBPの抗体を用いたウエスタンブロット法の確立を目指した。サンプル調製、SDS-PAGE、ブロッティングの条件について検討したところ、トラフグ血漿から複数のバンドが検出された。70～100 kDa程のサイズでは、既報とほぼ同サイズのバンドが得られた。一方で、それ以下のサイズでは既報よりも一つもしくは二つほど多く、バンドが検出された。既報は未成熟の個体を用いているが、本研究のトラフグは成熟個体である。この点から成熟段階の差により、発現するPSTBPのアイソフォームが変化する可能性が示唆された。成熟による変化などについては、より多くの個体を用いて詳細に検討していく必要がある。2023年度以前の研究では、成熟したトラフグの天然個体（1,500～2,000 g）におけるTTX蓄積を調査し、肝臓もしくは卵巣が主要な蓄積部位であることを明らかにした。また、養殖により作出されたトラフグのTTX非保有個体（約1,600 g）に対して、TTXの経口経管投与を行った。その結果、雌個体と雄個体の間に、体内へのTTX取り込み量では差がみられなかったものの、肝臓への蓄積量では差が認められた。また、雌個体における肝臓のTTX蓄積量の少なさには、卵巣へのTTX蓄積が関与することが推察された。今後は、これまでに得られてきた主要なTTX蓄積部位の情報とPSTBPの発現様式を突き合わせることで、トラフグ体内におけるTTXの輸送メカニズムが解明できるものと期待する。