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2019 Fiscal Year Research-status Report

太古の地球自転を時計タンパク質の分子構造にみる

Research Project

Project/Area Number 19K16061
Research InstitutionInstitute for Molecular Science

Principal Investigator

古池 美彦  分子科学研究所, 協奏分子システム研究センター, 助教 (70757400)

Project Period (FY) 2019-04-01 – 2022-03-31
Keywords概日時計 / 時計タンパク質
Outline of Annual Research Achievements

シアノバクテリアの概日時計を駆動する時計タンパク質KaiCは、試験管内においても24時間周期の化学反応を織りなす。KaiCはATP加水分解と自己リン酸化/脱リン酸化というふたつの機能を有するが、こうした化学反応の速度は地球の自転に対応しているために、太古のKaiCが復元できれば地球自転周期の歴史を明らかにすることができる。本研究課題では以下の3点について研究を進めている。(1)系統樹に基づき各年代の祖先型KaiCを復元する、(2)祖先型KaiCのATP加水分解反応や自己リン酸化/脱リン酸化反応を測定する、(3)祖先型から現生型KaiCに至る活性部位の立体構造を解明する。

2019年度は(1)、(3)の項目について進展があった。まず(1)について祖先型KaiCの配列推定に供するため、200種を超える現生シアノバクテリアのKaiC配列を収集した。これらの系統樹を作成し、分岐点における祖先型KaiCのアミノ酸配列を推定することが可能となった。次に(3)については複数種のシアノバクテリアに由来する現生型KaiCの結晶化条件を探索した。系統樹で同じグループに属するKaiCの活性部位の構造は互いに非常に似通っていることが判明し、祖先型KaiCの結晶化に向けて一歩前進した。2020年度は、(2)へ研究を進める計画となる。そのために(1)で得られる系統樹の再現性や未知の配列試料が出現した際の頑健性などを定量的に把握し、最善と判断される系統樹に基づいて(2)へと研究を進める。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

研究計画に挙げた3点のうち主要な2点について進捗があり、おおむね順調に進展していると判断できる。特にKaiCの結晶化条件の探索が想定よりも早く進展しており、2020年度以降には(2)の項目に労力を集中させることができる。

Strategy for Future Research Activity

2020年度には(1)の系統樹の再現性、頑健性を評価し、(2)へと計画を進める。2021年度には(3)に挙げた祖先型KaiCの結晶化を(1)(2)に基づいて進める。

  • Research Products

    (5 results)

All 2019

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Presentation (3 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results)

  • [Journal Article] Development and Optimization of Expression, Purification, and ATPase Assay of KaiC for Medium-Throughput Screening of Circadian Clock Mutants in Cyanobacteria2019

    • Author(s)
      Ouyang Dongyan、Furuike Yoshihiko、Mukaiyama Atsushi、Ito-Miwa Kumiko、Kondo Takao、Akiyama Shuji
    • Journal Title

      International Journal of Molecular Sciences

      Volume: 20 Pages: 2789~2789

    • DOI

      10.3390/ijms20112789

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] KaiC from a cyanobacterium Gloeocapsa sp. PCC 7428 retains functional and structural properties required as the core of circadian clock system2019

    • Author(s)
      Mukaiyama Atsushi、Ouyang Dongyan、Furuike Yoshihiko、Akiyama Shuji
    • Journal Title

      International Journal of Biological Macromolecules

      Volume: 131 Pages: 67~73

    • DOI

      10.1016/j.ijbiomac.2019.03.051

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Structural Relationships between ATP-hydrolysis and Phosphorylation Domains in Cyanobacterial Clock Protein KaiC2019

    • Author(s)
      Yoshihiko FURUIKE, Atsushi MUKAIYAMA, Eiki YAMASHITA, Takao KONDO, and Shuji AKIYAMA
    • Organizer
      V World Congress of Chronobiology
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Structural Diversity of KaiC Hexamer in Cyanobacterial Circadian Clock2019

    • Author(s)
      Yoshihiko FURUIKE, Atsushi MUKAIYAMA, Eiki YAMASHITA, Takao KONDO, and Shuji AKIYAMA
    • Organizer
      日本生物物理学会年会
  • [Presentation] 時計タンパク質KaiCのリン酸化ドメインにおける水分子の同定2019

    • Author(s)
      古池美彦、向山厚、山下栄樹、近藤孝男、秋山修志
    • Organizer
      日本結晶学会年会

URL: 

Published: 2021-01-27  

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