2021 Fiscal Year Research-status Report
真菌由来化合物ダイナピノンAが示す中性脂質分解促進活性の作用機序解析
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19K16320
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| Research Institution | Kitasato University |
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Principal Investigator |
小林 啓介 北里大学, 薬学部, 助教 (80794734)
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2019-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | 中性脂質 / ケミカルバイオロジー / 天然化合物 / 微生物資源 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
細胞内中性脂質蓄積阻害剤である真菌由来化合物ダイナピノンA (DPA) は、2つの軸異性体 (DPA1, M体とDPA2, P体) の1:1の混合物 (DPAmix) が最大の活性を示すというこれまでに前例のない生物活性を示す。本研究では、DPAの作用機序を解明するために、標的分子がタンパク質であると想定し、DPA結合タンパク質の探索を行った。DPAは誘導体化 (ケミカルプローブ化) によりその活性を消失してしまうことから、それを必要としない手法であるCellular Thermal Shift Assay (CETSA, Science 341, 84-87 (2013)) を応用し、DPA1、DPA2およびDPAmixそれぞれに対応する結合タンパク質の探索を行った。前年度は、その中で脂質代謝との関連性が報告されていたタンパク質から解析を進めたが、その分子は標的ではないことが示唆されたことから、その他分子について解析を進めた。siRNAを用いたノックダウン細胞を作成し、DPAの活性への影響を検討する予定であったが、調整したsiRNAではノックダウン効率が十分ではなく、配列の異なるsiRNAを使用しての再検討や過剰発現細胞を用いて活性への影響を検討する予定である。また、CETSAの他に、こちらもプローブ化を必要としない手法として最近報告されたsolvent-induced protein precipitation (SIP, Anal. Chem. 92, 1363-1371 (2020)) を応用し、継続して標的分子の探索を行っている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
新型コロナウイルスの影響で、研究試薬の調達に時間がかかったことなどから、計画通りに研究が進まなかった。その遅れをカバーすべく、再度の研究期間の延長申請を行なった。
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| Strategy for Future Research Activity |
現在、DPAの標的分子はタンパク質であると推定して研究を進めているが、その他分子 (例えば脂質や、糖、金属など) の場合も考慮し、トランスクリプトーム解析などから標的分子 (関連する経路) の推定を行うことも計画している。
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| Causes of Carryover |
新型コロナウイルスによる研究計画の遅れのため。
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Research Products
(1 results)
