粘液型脂肪肉腫におけるテロメア維持機構を通じた腫瘍進展メカニズムの解明

2022 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K16570
• Research Institution: Japanese Foundation for Cancer Research
• Principal Investigator: 山下 享子 公益財団法人がん研究会, がん研究所 病理部, 研究員 (50754975)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: 粘液型脂肪肉腫 / テロメア維持機構

Outline of Annual Research Achievements

がん細胞の無限増殖性に重要な役割を果たすテロメア維持機構には、テロメラーゼ再活性化とテロメラーゼ非依存性テロメア伸長（ALT）の2種類が知られている。粘液型肪肉腫はTERTプロモーター変異が高頻度に認められる数少ない肉腫として知られているが、少数例でALTが認められ、それらは相互排他的ではないと報告されている。本研究では、免疫染色やPCR、FISH法などを用いて両方のテロメア維持機構、さらにその原因となる遺伝子変化について調査した。
がん研有明病院で粘液型脂肪肉腫の原発巣切除手術を行った83症例につき、まず組織学的評価を行ったところ、腫瘍の大きさ、FNCLCC grade、壊死の有無が、全生存期間・無転移生存期間の両方と有意な関連が認められた。組織アレイを作製し、Telomere-specific FISHを施行したが、ALTを示す症例はみられなかった。
TERT遺伝子のプロモーター領域のhot spotにおける点突然変異（C228T or C250T）は、7割強の症例で認められたが、全生存期間および無転移生存期間、臨床病理学的特徴のいずれとも有意に相関しなかった。凍結検体よりRNAが採取できた症例でmRNA発現量をreal-time PCRで判定したところ、TERTプロモーターのhot spotにおける変異がない症例でも、TERT mRNAの発現が全例で認められ、陽性症例と同程度のTERT mRNA発現が認められた症例が7例存在した。こうした症例では、別のTERT活性化機構の存在が考えられ、さらにFISHとDNAシーケンスによる解析を進めたところ、TERTプロモーターのhotspot変異がない20例のうち、TERTの遺伝子内あるいはその周辺での染色体再構成が3例、TERTプロモーター領域の別箇所の変異（A161C, C237G）が2例に認められた。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

粘液型脂肪肉腫について、臨床病理学的評価に加え、ALTの有無、TERT遺伝子のプロモーター領域における点突然変異の有無、テロメア長測定、TERT遺伝子についてのFISH解析、予後との相関の有無などのデータをそろえ、論文発表した。その後まだ必要な関連研究が多少残っている。

Strategy for Future Research Activity

TERT遺伝子プロモーター領域のhot spotにおける点突然変異（C228T or C250T）がなくても、比較的高いTERT発現が認められた症例を主体に、TERT遺伝子の他の変異やプロモーター領域のメチル化など、他の腫瘍で報告されているような異常がないか検索していく。また対象として脱分化型脂肪肉腫でも同様の解析を行う。

Causes of Carryover

今回はコントロールとして検索した脱分化型脂肪肉腫において、TERTプロモーター領域のhotspotにおける変異がほとんど見られないのに対し、TERT遺伝子の増幅が一部の症例で認められることが分かった。粘液型脂肪肉腫のTERT異常について追加で検討するとともに、脱分化型脂肪肉腫についても同様の検討を行うことで、脂肪肉腫全体についての理解が深まると考えたが、本年度中にすべての解析を実施するには時間が足りなかったため、次年度に延長した。

Research Products

• [Journal Article] High prevalence of <i>TERT</i> aberrations in myxoid liposarcoma: <i>TERT</i> reactivation may play a crucial role in tumorigenesis (2022)
  • Author(s): Kunieda Junko、Yamashita Kyoko、Togashi Yuki、Baba Satoko、Sakata Seiji、Inamura Kentaro、Ae Keisuke、Matsumoto Seiichi、Machinami Rikuo、Kitagawa Masanobu、Takeuchi Kengo
  • Journal Title: Cancer Science Volume: 113 Pages: 1078～1089
  • DOI: 10.1111/cas.15256
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] TERTの融合遺伝子が認められた紡錘形細胞肉腫の2例. (2022)
  • Author(s): 國枝純子, 山下享子, 土橋映仁, 阿江啓介, 松本誠一, 植野映子, 蛭田啓之, 町並陸生, 竹内賢吾.
  • Organizer: 第111回日本病理学会総会
• [Presentation] 軟部血管線維腫の臨床病理学的検討. (2022)
  • Author(s): 山下享子, 馬場郷子, 冨樫由紀, 阿江啓介, 松本誠一, 植野映子, 中村卓郎, 蛭田啓之, 町並陸生, 竹内賢吾.
  • Organizer: 第111回日本病理学会総会
• [Presentation] 高度の多形性を示す孤立性線維性腫瘍の一例. (2022)
  • Author(s): 山下享子, 國枝純子, 池畑浩一, 伊藤崇彦, 藤山淳三, 阿部仁, 谷澤泰介, 阿江啓介, 蛭田啓之, 杉山裕子.
  • Organizer: 第63回日本臨床細胞学会総会
• [Presentation] 軟骨形成を伴う粘液型脂肪肉腫の1例. (2022)
  • Author(s): 伊藤崇彦, 山下享子, 早川景子, 石井脩平, 山田麻里沙, 山崎奈緒子, 池畑浩一, 藤山淳三, 千葉知宏, 佐藤由紀子, 阿江啓介, 河内洋, 松本誠一, 阿部仁, 杉山裕子.
  • Organizer: 第61回日本臨床細胞学会秋期大会