2020 Fiscal Year Research-status Report
早期胃癌におけるHER2不均一性の形成機序とトラスツズマブ治療抵抗性獲得の解明
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19K16593
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| Research Institution | Suzuka University of Medical Science |
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Principal Investigator |
金山 和樹 鈴鹿医療科学大学, 保健衛生学部, 助教 (20605943)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | 早期胃癌 / HER2 / Genetic heterogeneity / 治療抵抗性 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、HER2の腫瘍内不均一性(HER2 heterogeneity)を示す早期胃癌のHER2陽性腫瘍部位とHER2陰性腫瘍部位の癌関連遺伝子変異について網羅的に解析を行い、癌の早期段階で認められるHER2腫瘍内不均一性がどのような遺伝子変異を伴って形成されているのか、また、トラスツズマブ治療抵抗性の変異が早期の段階で獲得されるのかどうかについて明らかにすることを目的としている。
本年度の研究では、(1)HER2不均一性を示す早期胃癌の癌連遺伝子変異解析、(2)HER2陽性胃癌細胞株のHER2遺伝子増幅およびHER2タンパク発現解析、(3)Mutagenesis Kit(TOYOBO)を用いた遺伝子変異の導入、の3つについて研究を行った。(1)については前年度解析できなかったHER2不均一性を示す早期胃癌の症例を再度ピックアップするために解析対象期間を広げてHER2免疫組織化学染色を施行し、HER2不均一性症例を検出後、DNAクオリティーチェックを行った。(2)についてはHER2陽性胃癌細胞株と報告されているNCI-N87、MKN7、NUGC-4のHER2遺伝子増幅とHER2タンパク過剰発現についてFISH法とウェスタンブロット法で解析を行った結果、細胞株間でHER2遺伝子増幅腫瘍細胞数にバラツキが認められ、HER2タンパク発現についても差が認められた。(3)については癌関連遺伝子のcDNAを購入し、Mutagenesis Kitで遺伝子変異の導入を行い、プロトコールを作製した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
昨年度解析できなかったHER2不均一性早期胃癌の癌関連遺伝子変異について、現在解析を進めているが、まだ十分に検討ができていない。Ion Repoterで重要度が高い遺伝子変異を検出し、トラスツズマブ治療抵抗性への関与について検証を行っていく。
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| Strategy for Future Research Activity |
HER2不均一性早期胃癌の癌関連遺伝子変異についてIon Repoterで解析を行い、重要な遺伝子変異の検出を行う。また、前年度に解析を行ったHER2 homogeneityを示す早期胃癌との相違点についても検討を行う。Ion Pepoterで遺伝子変異を検出後、Mutagenesis Kitで検出された遺伝子変異を作製し、リポフェクション法でHER2陽性胃癌細胞株への導入を行う。導入後、トラスツズマブの効果について検討を行う。
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| Causes of Carryover |
本年度中に解析終了予定であったものが一部未完了のため。引き続き次年度に解析費として使用する予定である。
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Research Products
(5 results)
