2019 Fiscal Year Research-status Report
結核菌由来メンブレンヴェシクルが菌の宿主内潜伏に果たす役割と分子機構の解明
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19K16651
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| Research Institution | Osaka City University |
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Principal Investigator |
山口 雄大 大阪市立大学, 大学院医学研究科, 助教 (40726080)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | メンブレンヴェシクル / 結核 / 宿主内潜伏 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は結核菌の潜伏を阻害する新規治療法の開発を最終目標に、結核菌由来メンブレンヴェシクル（MV）による宿主細胞内潜伏の機序解明を行う。これまでの予備的検討で、メンブレンヴェシクルを構成するタンパク質を網羅的解析により同定している。同定されたタンパク質の中から、MV産生制御に関わる分子を同定するため、各分子の発現抑制株をCRISPR interferenceで作成した。各株から産生されるMV量を定量することでMV産生制御に関わる分子の同定と、高産生・低産生株の作成を試みた。
速育成抗酸菌のMycobacterium smegmatisではいくつかの分子がMVの産生に関わることがわかり、高産生・低産生株の作成に成功した。しかし、同様の手法を用いて、ヒト型結核菌に近縁のウシ型結核菌（Mycobacterium bovis）弱毒株BCGでのMV高産生・低産生の菌株の作成を試みたが、低産生株の作成ができなかった。宿主への感染実験によるMVの機能解析の検討を当初の計画に予定していたが、上記の理由のため実施できなかった。
代替する機能解析実験として、宿主細胞へMVを用いた刺激を行い、遺伝子発現・タンパク質発現解析を実施中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
BCGでのMV高産生・低産生株の作成が進んでおらず、MVの機能解析の検討など全体の計画に遅延が出てしまった。
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| Strategy for Future Research Activity |
MV高産生・低産生株の作成は引き続き行いつつ、MVを用いた宿主細胞・動物への刺激実験を予定する。
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| Causes of Carryover |
実験に使用する組換え菌株の作成に難航したため。
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[Journal Article] Soluble urokinase-type plasminogen activator receptor represents exercise tolerance and predicts adverse cardiac events in patients with heart failure2019
Author(s)
Ishikawa H, Izumiya Y, Shibata A, Ichikawa Y, Yamaguchi T, Yamaguchi Y, Kitada R, Iwata S, Ehara S, Tomita S, Hanatani A, Yoshiyama M
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Journal Title
Heart and vessels
Volume: -
Pages: -
DOI
Peer Reviewed
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