2021 Fiscal Year Research-status Report
ロタウイルスワクチンに対する宿主免疫応答と腸内フローラとの関連性解析
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19K16677
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| Research Institution | Fujita Health University |
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Principal Investigator |
平松 裕之 藤田医科大学, 医学研究科, 研究員 (80623206)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | ロタウイルス / ワクチン / 腸内フローラ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、ロタウイルスワクチン接種により誘導される宿主免疫反応と腸内フローラの関連性に着目し、NICU入院中の早産児を対象としてワクチン接種後の便中ワクチン株排泄と宿主免疫応答に対する腸内フローラの影響を明らかにすることを目的としている。これまでに、1価ワクチン（RV1）を接種した20例、5価ワクチン（RV5）を接種した20例の児から、接種後の血清、接種後７日間の便、母乳栄養児の場合は可能な範囲で接種後の母乳を採取した。便からRNAを抽出し、便中ワクチン株RNAを、RV1特異的Real-time PCR法とG遺伝子型別RV5特異的Real-time PCR法を用いて定量的に解析した。また、RV1接種児の血清についてはRV-IgG、IgA抗体価をin-house ELISA法で測定した。双生児４組について、経時的な便中RV1ゲノム定量値、RV1-IgG、IgA抗体価の推移について、双生児を同一人物としてモデル化した場合と別人としてモデル化した場合の適合度をLikelihood-ratio testで比較することにより、統計学的にその類似性を検討した。その結果、1回目接種後7日目までの便中RV1ゲノム量の推移は、双生児を同一人と仮定したモデルの方が別人と仮定したモデルよりも有意に適合度が良く(p=0.049)、一方で接種前から2回目接種後7日間の便中排泄では、有意差を認めなかった。また、接種前から2回目接種後までの抗体価の推移について2つのモデル間で解析した結果、RV-IgG抗体価については有意差(p=0.015)を認めたが、IgA抗体価は有意差を認めないことが明らかとなった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
RV1、RV5の接種時に採取した便検体からDNAを抽出し、次世代シーケンサーによる16s rRNA解析を終了している。また、全てのサンプリングを終了し、経時的な便中RV1ゲノム定量値、RV1-IgG、IgA抗体価の推移の類似性について、単胎児と多胎児で統計学的な有意性を示した。2021年度においては国内学会に本研究の現在までの成果について公表した。
一方、採取した母乳の細菌叢解析、これまでに測定した便中RV1ゲノム定量値、RV1-IgG、IgA抗体価、臨床的特徴と16s rRNA解析結果との比較について未着手である。
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| Strategy for Future Research Activity |
1. 血清抗体価の測定、便中ワクチン株の定量及び遺伝子型判別を行う。
2. マイクロバイオーム解析: 母乳検体から次世代シーケンスを行い、16S rRNAの配列を取得。得られた配列から解析ツールを用いて16S rRNAデータベースから系統分類解析や相同性検索を行うとともに、各検体の細菌叢の比較を実施する。
研究成績について、国内、国際学会で本研究成果を公表し、最終的に英文誌へ投稿する。
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| Causes of Carryover |
収集した検体についてリアルタイムPCR測定、ELISA測定、NGS解析を実施するため、関連する試薬等の消耗品の購入にあてる。また、これらデータに関する打ち合わせや学会発表等を含め、それら旅費にあてる。
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