2019 Fiscal Year Research-status Report
The biological and clinical significance of the novel GC oncogenes that were identified by in silico analysis
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19K16718
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
胡 慶江 九州大学, 大学病院, 医員 (80792902)
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2019-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | OSBPL3 / 胃癌 / 増殖能 / 細胞周期 / RRAS / RNA-seq / in silico解析 / Xenograft mouse |
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| Outline of Annual Research Achievements |
胃癌の公共データベースを用いたin silico解析で新規癌遺伝子OSBPL3を同定した。本研究はOSBPL3の胃癌における生物学的意義と臨床学的意義を明らかにし、その根底にあるメカニズムを探索することを目的とした。
初年度では、OSBPL3発現の高い胃癌細胞株を二つ選択し、後続の実験を行なった。OSBPL3をsiRNAとshRNAでそれぞれノックダウンし、増殖能、遊走能、浸潤能、細胞周期進行の変化を評価し、OSBPL3の胃癌細胞表現型に対する影響を検討した。OSBPL3ノックダウン胃癌細胞株においては、増殖能が抑制され、細胞周期の進行も阻害されたことを確認した。また、Xenograft mouseを作製し、生理的な状況下でOSBPL3ノックダウンによる胃癌細胞増殖能の低下を確認した。一方、OSBPL3のノックダウンにより、浸潤能と遊走能に有意な変化が見られなかった。OSBPL3は胃癌細胞の細胞周期進行と増殖能に関与すると考えられた。
また当院の胃癌組織にてOSBPL3の免疫染色を行った。OSBPL3は腫瘍周囲の間質細胞や非癌組織細胞よりも癌細胞に高発現していることを確認した。また、二つの胃癌データセット（公共データベース）を用いて、OSBPL3 mRNA高発現が予後不良規定因子であることを確認した。臨床病理学因子の検討においてはOSBPL3 mRNA高発現が高分化、深達度（T3以上）、リンパ節転移、Stage III以上と有意に関連していた。
OSBPL3が胃癌細胞の増殖能と細胞周期進行、予後不良に関与するメカニズムを調べるため、OSBPL3ノックダウン胃癌細胞株からRNAを抽出し、RNA-seqに提出する予定である。また、pull down assayにてOSBPL3とRRASの関連を評価する予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
概ね予定通り実験、研究を遂行しております。
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| Strategy for Future Research Activity |
OSBPL3ノックダウン胃癌細胞株とコントロール細胞株からRNAを抽出し、RNA-seqを行う予定である。また、pull down assayにてOSBPL3とRRAS、Aktの関連を評価する予定である。OSBPL3が胃癌細胞の増殖能と細胞周期進行、予後不良に関与するメカニズムの探索を行い、最終的にOSBPL3の阻害薬を同定していく方針である。
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