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2020 Fiscal Year Research-status Report

iPS細胞による神経芽腫発がんモデルを用いたALT陽性難治腫瘍の治療開発

Research Project

Project/Area Number 19K16759
Research InstitutionResearch Institute for Clinical Oncology, Saitama Cancer Center

Principal Investigator

迎 恭輔  埼玉県立がんセンター(臨床腫瘍研究所), 臨床腫瘍研究所, 研究員 (60793974)

Project Period (FY) 2019-04-01 – 2022-03-31
Keywords神経堤細胞 / iPS細胞 / ATRX / ALT
Outline of Annual Research Achievements

前年度の実績において、Li-Fraumeni (Li-F) 症候群 iPS 細胞由来の頭部神経堤細胞 (cNCC) からSingle guide RNA によるATRX欠損株 (Li-F ATRX KO cNCC) を作製し、限界希釈法を用いたLi-F ATRX KO cNCCクローンかを行なった。そのクローンにおいてC-circle陽性細胞を得ることができた。しかし、本年度においてそのクローンをソフトアガーコロニー形成解析したが、コロニーを形成しなかった。これはATRX欠損による影響が強く現れていると考えられる。神経堤細胞には、cNCCと体幹部神経堤細胞(tNCC)がある。神経芽種はcNCCとtNCCの両方から発生する可能性があるが、頻度としてはtNCCからの発生が多いと考えられている。しかしながら、tNCCの分化誘導は確立された方法がある一方で、tNCCを維持培養をする条件が確立されていなかった。そこで、本年度はtNCC維持培養法の確立を行い、Li-F iPS細胞からtNCCへの分化も試みており、cNCCと同様な方法でATRX KO tNCCを作製している。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

体幹部神経堤細胞(tNCC)の維持培養法が確立されていないため、その方法を確立するための時間を有した。また、ATRX KOによる細胞増殖の影響が大きく、ソフトアガーコロニー形成単離後の細胞維持が困難だった。

Strategy for Future Research Activity

tNCC維持培養法を確立することができたため、cNCCとtNCCの2通りの分化細胞を用いて、ATRX KO欠損株を作製することができる。また、ATRX KOによる細胞増殖の影響が大きいことが分かったので、ソフトアガーコロニー形成における細胞数を増やし、形質転換能が高いと想定される、より大きいコロニーを多数単離する。その中で、増殖の早い細胞のみを選定し、マウス皮下移植によってがん化を試みる。

Causes of Carryover

(次年度使用額が生じた理由)割引価格購入により、定価購入よりも安く試薬類を調達することができたため、翌年度分の研究費として使用することを計画したため。

(使用計画)これまでと同様に、研究経費の多くは解析用消耗品費にあてられる予定である。

  • Research Products

    (2 results)

All 2021 2020

All Presentation (1 results) Patent(Industrial Property Rights) (1 results)

  • [Presentation] Development of artificial tumorigenesis model from iPSC-based neural crest cells2020

    • Author(s)
      迎 恭輔、竹信 尚典、神田 浩明、大平 美紀、遠藤 悠紀、春田 雅之、戸口田 淳也、長船 健二、中畑 龍俊、上條 岳彦
    • Organizer
      第62回日本小児血液・がん学会学術集会
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 核酸抽出方法、及び核酸抽出装置2021

    • Inventor(s)
      武居 修、上條 岳彦、迎 恭輔
    • Industrial Property Rights Holder
      武居 修、上條 岳彦、迎 恭輔
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Industrial Property Number
      特願2021-047528

URL: 

Published: 2021-12-27  

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