Functional analysis of Kruppel-like factor 5 (KLF5) protein complex in colorectal cancer and its application to drug discovery

2023 Fiscal Year Final Research Report

• Project/Area Number: 19K16777
• Research Category: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Review Section: Basic Section 50010:Tumor biology-related
• Research Institution: Jichi Medical University
• Principal Investigator: Tsuji Kentaro 自治医科大学, 医学部, 助教 (00835712)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: KLF5 / 大腸癌 / モデルマウス

Outline of Final Research Achievements

KLF5 is a transcription factor that plays an important role in the development of colorectal cancer. The better understanding of how KLF5 interacts with co-transcription factors or other molecules during the tumorigenesis of colorectal cancer could lead to the identification of novel druggable molecular pathways. In this study, we generated a mouse model of colorectal cancer expressing double-tagged KLF5 protein, which enable us to purify KLF5 protein complexes with higher specificity from tumor tissue-derived crude protein extracts.

Free Research Field

病理学

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

特定の蛋白を精製するために一般に用いられる免疫沈降法では、目的とする蛋白以外の分子が反応に用いる抗体に非特異的に結合することが精製物の純度を下げる原因となる。特に、多彩な細胞や細胞外基質からなる生体組織に由来する蛋白粗抽出液は、とりわけ夾雑物の多さが蛋白精製の阻害要因となっていた。本研究で作製した大腸癌モデルマウスでは、精製の際の目印となるタグ蛋白がKLF5蛋白に2種類付加されている。このマウスの組織から蛋白を抽出し、各タグ蛋白に結合する2種類の抗体を用いた免疫沈降法を順次行うことで、より高い純度でのKLF5蛋白複合体精製が可能になることが期待される。