Possibility of antibody drug conjugate targeting EGFR in triple negative breast cancer

2021 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 19K16780
• Research Institution: Juntendo University
• Principal Investigator: 中井 克也 順天堂大学, 医学部, 准教授 (10384108)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: Triple Negative乳癌 / 上皮増殖因子受容体 / 抗体薬物複合体 / 効果予測因子 / アルギニン・メチルトランスフェラーゼ / メチル化

Outline of Annual Research Achievements

われわれの研究成果としては，EGFRがTN（Triple Negative）乳癌でメチル化の有無をTN乳癌細胞株について3つのサブグループにわけて調査した．Basalタイプ（HCC38、HCC1937，MDA-MB-468），Mesenchymalタイプ（BT-549，Hs-578、MDA-MB-436，MDA-MB-231）Luminal ARタイプ（MDA-MB-453）についてR198 / 200でメチル化されたEGFRに対する特異抗体を使用しウエスタンブロット分析をおこなった．その結果，EGFRの発現はMDA-MB-453を除くすべての細胞で発現が認め，PMRT1はすべての乳癌細胞株で認められた．メチル化されたEGFRはMDA-MB-468のみに検出された．さらに我々はMDA-MB-468においてPRMT1のノッツクダウン細胞MDA-MB-468 shPRMT1細胞を作成した．EGFRメチル化はPRMT1ノックダウン細胞で大幅に減少し，EGFRのリン酸化と，下流のAKT，ERK，およびSTAT3のEGF誘導リン酸化が，対照細胞と比較してPRMT1ノックダウン細胞で減少していることが判明した．さらにPRMT1ノックダウン細胞については，Cell proliferation assay，Cancer sphere formation assay，Colony formation assayを行い，PRMT1が細胞増殖に関与することを確認した．TNBC組織マイクロアレイの免疫組織化学（IHC）染色により，TNBC患者組織のEGFRメチル化状態を調べた．患者組織の20％で高頻度にEGFRメチル化（R198/200）されていることが判明した．EGFRをターゲットにしたADC製剤において，治療効果が期待できる群が存在し，その治療効果予測因子として機能する可能性が認められた．