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2020 Fiscal Year Annual Research Report

EGFR変異肺癌における小細胞肺癌への形質転換によるTKI耐性獲得機序の検索

Research Project

Project/Area Number 19K16785
Research InstitutionKindai University

Principal Investigator

古賀 教将  近畿大学, 大学病院, 助教 (20813314)

Project Period (FY) 2019-04-01 – 2021-03-31
KeywordsEGFR / 獲得耐性 / 小細胞転化 / 神経内分泌腫瘍 / Synaptophysin / Chromogranin / NCAM1
Outline of Annual Research Achievements

EGFR遺伝子変異陽性の肺癌細胞株であるPC9(Exon 19 deletion)、HCC827(Exon 19 deletion)、H3255(Exon 21 L858R)の3株において、CRISPR/Cas9を用いてTP53遺伝子とRB1遺伝子のノックアウト株を作成し、これらに対して薬剤慢性曝露によってEGFR-TKI(エルロチニブ、アファチニブ、オシメルチニブ)耐性株を計15株樹立した。これらEGFR-TKI耐性株について神経内分泌マーカー(Synaptophysin, Chromogranin, NCAM1)の発現を免疫染色とqPCRで検証し、小細胞肺癌転換の有無を検討した。TP53/RB1ノックアウト株では神経内分泌マーカーの発現に認められなかった。EGFR-TKI耐性株のうち、アファチニブ耐性、オシメルチニブ耐性を獲得したPC9クローンでNCAM1の発現の上昇を認めた。その他のEGFR-TKI耐性株では形態変化や神経内分泌マーカーの明らかな上昇は認めなかった。正常気管支上皮細胞株に遺伝子操作を加えて神経内分泌細胞に転化させた既報においては(Park JW, et al. Science 2018)、in vivo (異種移植)による腫瘍形成後に、組織形態ならびに神経内分泌細胞マーカー発現の変化が検証されていたため、本研究においてもヌードマウスに親株・TP53/RB1 ダブルノックアウト株・EGFR-TKI耐性株、計14株を異種移植し、生着・増大したxenograft 14株(コントロールを含む)を切除し、FFPE作成・核酸抽出を行なった。現在これらxenograftの神経内分泌マーカーを検証中である。

  • Research Products

    (4 results)

All 2021 2020

All Journal Article (2 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Peer Reviewed: 2 results,  Open Access: 1 results) Presentation (2 results)

  • [Journal Article] Dose-dependence in acquisition of drug tolerant phenotype and high RYK expression as a mechanism of osimertinib tolerance in lung cancer2021

    • Author(s)
      Shuta Ohara, Kenichi Suda, Toshio Fujino, Akira Hamada, Takamasa Koga, Masaya Nishino, Masato Chiba, Masaki Shimoji, Toshiki Takemoto, Junichi Soh, Tetsuya Mitsudomi
    • Journal Title

      Lung Cancer

      Volume: 154 Pages: 84-91

    • DOI

      10.1016/j.lungcan.2021.02.017

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Activity of tarloxotinib-E in cells with EGFR exon-20 insertion mutations and mechanisms of acquired resistance2021

    • Author(s)
      Masaya Nishino, Kenichi Suda, Takamasa Koga, Shuta Ohara, Toshio Fujino, Junichi Soh, Vijaya Tirunagaru, Avanish Vellanki, Robert C. Doebele, Tetsuya Mitsudomi
    • Journal Title

      Thoracic Cancer

      Volume: - Pages: 1-6

    • DOI

      10.1111/1759-7714.13931

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Presentation] 肺癌切除検体を用いたLung Tumor Organoidの樹立と解析2020

    • Author(s)
      古賀教将, 須田健一, 小原秀太, 藤野智大, 西野将矢, 濱田顯, 千葉眞人, 武本智樹, 宗淳一, 光冨徹哉
    • Organizer
      第120回日本外科学会定期学術集会
  • [Presentation] KRAS G12C阻害剤の感受性ならびに耐性二次変異の検索2020

    • Author(s)
      古賀教将、須田健一、小原秀太、藤野智大、濱田顕、宗淳一、光冨徹哉
    • Organizer
      第61回日本肺癌学会学術集会

URL: 

Published: 2021-12-27  

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