2020 Fiscal Year Research-status Report
ヒト膵臓がん細胞株の麻疹ウイルス感染制御機構の解明
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19K16862
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
早稲田 真澄 京都大学, iPS細胞研究所, 特定研究員 (60794295)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | 膵臓がん / 麻疹ウイルス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、がん細胞を標的とした抗原特異的Ｔ細胞療法において問題となる「抗原発現の不均一性」を解消するために必要となる、多様な膵臓がん細胞に対して持続感染可能な腫瘍溶解性ウイルスベクターの開発を最終目的としている。
昨年度は、理化学研究所バイオリソース研究センター（ＲＩＫＥＮ ＢＲＣ）およびアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（ＡＴＣＣ）より導入した膵臓がん細胞株９株（ＡｓＰＣ－１, ＢｘＰＣ－３, Ｃａｐａｎ－２, ＫＬＭ－１, ＭＩＡ ＰａＣａ２, ＰＡＮＣ－１, ＰＫ－１, ＰＫ－８, ＰＫ－５９）および当該細胞のＮｅｃｔｉｎ－４強制発現株の凍結細胞ストックを十分量用意し、感染実験の実施に向けた準備を進めていた。しかしながら、新型コロナウイルスの突然の大流行により勤務制限と移動制限が行われた結果、感染実験の実施には至らなかった。
そこで本年度は所属研究所内で実施可能な代替実験系の構築および実施を進める予定である。ウイルスゲノム上のＦタンパク質遺伝子を欠損する麻疹ウイルスは増殖力欠損株であり大臣確認実験に該当しないため、通常のＰ２施設にて取扱い可能である。ＧＦＰを発現する当該ウイルスを用いた感染実験を行い、ＧＦＰ陽性細胞をウイルス感染細胞としてＲＮＡ－ｓｅｑによる遺伝子発現解析を実施することにより、麻疹ウイルス感染により膵がん細胞株内で発現変動する遺伝子を特定する。さらに、パスウェイ解析等のバイオインフォマティクスを活用することにより、耐性機構の分子機序を明らかにしていく。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
研究計画当初に使用予定であった研究設備が使用できず、当該年度の主たる実験である蛍光タンパク質を発現する麻疹ウイルスを用いた感染実験が実施できなかったため。また新型コロナウイルスの流行に伴い、大幅な勤務制限および移動制限が課せられたため。
他大学にて代替設備の確保と整備を進めており、必要な事務手続きまでは完了している。
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| Strategy for Future Research Activity |
麻疹ウイルスを用いたNectin-4発現膵臓がん細胞株への感染実験を含め、昨年度に実施できなかった実験を実施し、膵臓がん細胞株のウイルス耐性機構の解明を進める。
研究計画当初に使用予定であった実験設備の代わりとなる設備の導入と整備を進めており、準備が整い次第上述した研究内容を遂行していく。
新型コロナウイルスが再度感染拡大し研究活動が大幅に制限される事態においても実験を進められるよう、所属研究所内で実施可能な代替実験系の構築を進める。
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| Causes of Carryover |
新型コロナウイルスの流行に伴う勤務制限および移動制限により当初予定していた実験よりも実際に実施できた実験量が少なかったため。
麻疹ウイルス感染膵臓がん細胞株のRNA-seq解析を実施する際に使用予定である。
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